丹麦Nunc血清移液管，总容量，10ml

细胞培养注意事项（入门级）

培养操作过程：注意无菌。无论哪一管液体，开盖后尽量立即关上（如果有几瓶都需要开的，也注意，可以虚盖）。盖子向上放。操作时不要从开盖的容器上方经过。另外，无菌台面上摆放的各种东西，最好是一字摆开，平行于自己。尽量不要前后重叠。细胞操作中所用的所有耗材试剂最好都是细胞培养专用。一般都以一次性耗材居多。1ML枪头为加长型专用培养枪头。移液管亦有专用10mL一次性无菌移液管（1）细胞换液：培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液，加入新培养液。（2）细胞传代：传代之前先观察，细胞是否密集，是否开始融合。一般融合

流感病毒的MDCK细胞分离方法

素G；10000µg/mL硫酸链霉素6、牛血清白蛋白组分Ⅴ，7.5%溶液7、临床样品0.5mL8、1mL无菌移液管9、10mL无菌移液管10、15mL无菌离心管（三）实验步骤1、准备病毒生长液（1）细胞维持液准备500mL D-MEM液中加入①青、链霉素母液 5mL（终浓度达：100U/mL青霉素；100µg/mL链霉素）②牛血清白蛋白组分Ⅴ 12.5mL（终浓度：0.2%）③HEPES缓冲液 12.5mL（终浓度：25mM）（2）病毒生长液每500

MDCK细胞培养

℃5. HEPES缓冲液，1M母液6. 胎牛血清7. EDTA-胰酶（0.05%胰酶，0.53mM EDTA-4Na），分装后保存于-20℃8. 7.5%牛血清白蛋白组分V9. 1mL、10mL无菌移液管10. 70％～75％的酒精注意事项：经常检查试剂使用的有效期。（三）实验步骤 这里以T75细胞瓶的单层细胞培养为例，叙述MDCK细胞的培养程序。如果细胞瓶的规格有变，MDCK细胞悬液的量必须做相应的调整。 1. D-MEM培养液的准备 500mL D-MEM液中加入： 青、链霉素母液5mL（终浓度达