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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Glycolysis/OXPHOS Assay Kit
- 库存:
现货
- 供应商:
上海研卉生物科技有限公司
- 规格:
50T
糖酵解/氧化磷酸化检测试剂盒,Glycolysis/OXPHOS Assay Kit
货号:G270
特点:●酶标仪即可检测,无需昂贵的检测仪器●试剂盒包含所有所需试剂 All in One Kit

产品概述
很多癌细胞都是主要依靠糖酵解途径产生ATP,而近年来的研究发现,如果抑制癌细胞的糖酵解途径,细胞中的主要能量代谢会从糖酵解途径向线粒体的氧化磷酸化途径转移。对于这一现象的研究,有望成为新的抗癌药物研发的靶点,并且在细胞衰老、神经退行性疾病等其他疾病的治疗和药物研发的工作中也具有潜力,因此而备受瞩目。
本试剂盒通过酶标仪就可以方便快捷的检测糖酵解能、细胞代谢途径转移、细胞对糖酵解途径和氧化磷酸化途径的依赖程度。试剂盒中包含所有所需的试剂,可大幅减少实验前的准备工作和时间。
常见问题Q&A
| Q:一个试剂盒可以检测多少个样品? |
| A:按照每个样品3个复孔计算,可检测的样品数请见下表: |

※以上是按照不做预实验,最多可能检测的样品数量。
※Lactate Assay时,如果培养基内含有血清,建议单独检测含有血清的培养基,作为背景空白扣除。

※以上是先做预实验,再做正式实验时,最多可能检测的样品数量。
※Lactate Assay时,如果培养基内含有血清,建议单独检测含有血清的培养基,作为背景空白扣除。

糖酵解能评价(Lactate Assay)的孔板设置例(n=3时)
(左:不做预实验; 右:做预实验)

代谢途径转移评价(ATP Assay)的孔板设置例(n=3时)
(左:不做预实验; 右:做预实验)

代谢途径依赖程度评价的孔板设置例(n=3时)
(左:ATP Assay; 右:Lactate Assay)(不做预实验)

代谢途径依赖程度评价的孔板设置例(n=3时)
(左:ATP Assay; 右:Lactate Assay)(做预实验)
| Q:在做糖酵解能评价时,实验孔与空白孔(只含培养基)的吸光度没有变化,是什么原因?有哪些改善方法? |
| A:可能的原因是细胞释放的乳酸量过少,建议提高细胞数,增加培养时间(3小时⇒5小时)。 |
| Q:是否需要通过使用蛋白质定量分析使乳酸和ATP浓度正常化? |
| A:Oligomycin和2-DG处理5小时的检测结果,用蛋白定量校正和不校正的结果几乎没有变化。但是,如果检测中使用其他药物时,请预先确认该药物是否会对细胞数和蛋白质的量有影响,然后再用本试剂盒检测。 |

需要用蛋白质定量进行校正的时候,请参考下图中的步骤。
※在进行蛋白质定量校正的时候,由于ATP Assay的试剂的原因,不能使用ATP Assay或Lactate Assay检测时使用的细胞,请额外专门准备蛋白质定量用的细胞悬液。

| Q:Lactate Assay时,是否可以用450 nm以外的滤光片检测? |
| A:如果没有450 nm的滤光片,可以用490 nm滤光片检测,不过检测得到的吸光度的值要比450 nm检测时低。 |

| Q:发光信号是否稳定? |
| A:发光信号在3小时以内都稳定。不过,发光信号会受温度和光照影响,如果不能立即检测的话,请在避光和25℃环境下静置。 |
| Q: ATP检测时用的发光法,检测波长为多少? |
| A:由于是通过萤光素检测,所以检测波长为556 nm。 |
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