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- 康朗生物
- KLM3023
- 上海
- 2025年07月15日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
原代细胞
- 细胞类型：
见说明书
- 肿瘤类型：
见文献
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 库存：
5×105
- 生长状态：
良好
- 年限：
永久
- 运输方式：
新鲜/干冰
- 器官来源：
神经
- 是否是肿瘤细胞：
见文献
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
见文献
- 物种来源：
大鼠
- 相关疾病：
见文献
- 组织来源：
神经
- 规格：
5×105
细胞简介：
动物体的小脑颗粒细胞约有500亿，约占其脑细胞的3/4 左右。动物体的小脑颗粒细胞从许多条苔状纤维接受信号，通过平行纤维传入浦肯野细胞，引起简单锋电位。小脑的高尔基细胞能抑制颗粒细胞，限制对浦肯野细胞进一步激活，起到时间聚焦作用。小脑颗粒细胞作为有效的细胞形态学实验模型在检测药物致中枢神经毒性的动物研究而备受关注，广泛应用于药理学和神经病理学动物实验。
本公司生产的小鼠小脑颗粒细胞采用酶解法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息：
我们推荐使用康朗生物研制的小鼠小脑颗粒细胞专用完全培养液（产品编号：KLM6023-5）作为体外培养小鼠小脑颗粒细胞的培养基。
细胞培养过程中，传代是非常重要的环节，若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害，原代细胞因其培养难度高且传代次数有限，细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验，总结出一套细胞消化的方法，有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家：1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（BPF，货号KL8248）包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（T/E，货号KL0103），胰胰中和液（TNS，货号KL0113）和不含钙镁离子的DPBS（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间，准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清（FBS，货号KL0500）。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。
8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验相关专题 [实验目的] 通过观察毁损一侧小脑动物的运动障碍，了解小脑对肌紧张和身体平衡等躯体运动的调节功能。 [实验原理] 小脑是调节躯体运动的重要中枢，它的主要功能是维持身体平衡、调节肌紧张和协调随意运动。小脑损伤后发生躯体运动障碍，主要表现为身体失衡、肌张力增强或减弱及共济失调。 [实验器材与药品] 哺乳动物手术器械，鼠手术台，9号注射针头，棉花，200ml烧杯，乙醚。
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摇动（Swaying,Sw）：Sw/Sw鼠主要症状是躯体共济失调和四肢强直。小脑前蚓部大多缺失，下丘脑向外侧错位，上丘脑直接与小脑白质混为一体。尽管小脑皮质被破坏，但浦表野氏细胞和颗粒细胞之间的组织学关系基本正常。 ⑸摇晃（Weaver,Wr）:Wv/Wv鼠出生后8～10天可出现步态不稳，倒下和试图恢复平衡时身体和四肢有颤抖表现。当鼠受刺激或兴奋时跳跃较高（一般可达25cm）。小脑的颗粒细胞几乎完全缺乏。发现于C57BL/6J小鼠。 （二）髓鞘异常
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