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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
42
- 英文名：
Photobacterium damselae
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海谷研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
详见说明书
操作方法
1直接测定
2测定准备
3背景对照测定
4样品活性测定
5计算样品活性
Photobacterium damselae美人鱼发光杆菌PCR试剂盒规格样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
Photobacterium damselae美人鱼发光杆菌PCR试剂盒规格15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶标板：用于比色的容器
分光光度仪：用于比色分析
酶标仪：用于微量样品比色分析
储存条件
14℃或－20℃
Photobacterium damselae美人鱼发光杆菌PCR试剂盒规格准备物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀释液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
产品说明书 1份
Photobacterium damselae美人鱼发光杆菌PCR试剂盒规格其他备注
1．本产品为50次操作
2．操作时，须戴手套
3．操作时，避免污染母液
4．即刻进行荧光检测分析
5．本产品染色剂不易洗掉，染色持久
6．本公司提供系列试剂产品
使用方法：
注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1. Photobacterium damselae美人鱼发光杆菌PCR试剂盒规格样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。
2.加样（样本处理区）
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。
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文献和实验仪，则需要同时使用荧光探测仪测量反应管中的荧光信号，计算出RQ+、RQ-、△RQ。RQ+代表样品管荧光发射基团发光强度与淬灭基团发光强度的比率，RQ-代表空白管中二者的比率，△RQ（△RQ=RQ+-RQ-）代表PCR过程中荧光信号变化量，经过数据处理，即可得出定量结果。由于荧光探针的引入，显著提高了实验的特异性。探针设计一般应符合以下条件[2]：①探针长度应在20～40个碱基左右，以保证结合的特异性。②GC碱基含量在40%～60%，避免单核苷酸序列的重复。③避免与引物发生杂交或重叠。④探针与模板
菌 Peptostreptococcus prevotii 普氏消化链球菌 Peptostreptococcus spp 消化链球菌属某些种 Photobacterium damsela 美人鱼发光杆菌 Pichia carsonii 卡氏毕赤酵母 Pichia etchellsii 埃切毕赤酵母 Pichia farinosa 粉状毕赤酵母 Pichia ohmeri 奥默毕赤酵母 Pichia spartinae 斯巴达克毕赤酵母 Plesimonas
发光细菌 lnminescent bacteris.luminousbacteria
（ Photobacterium phosphoreum ）可在牛马的死屍和肉中繁殖；它侵入人体则会产生发光尿。这些细菌一般好低温，最适温度约为 18 ℃， 37 ℃以上则不发光。发光现象是酶促氧化反应，必需 FM － NH 2 ， O 2 长链饱和醛，虫荧光素酶等。一般认为 FMNH 2就是荧光素。发光细菌有一百几十种，除上述几种外，典型的还有鱼无色杆菌（ Achromobac-ter fisheri ）、磷光弧菌（ Vibrio phosphoresce － ns ）、发光杆菌（ Bacillus photogenus
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