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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
194
- 英文名:
Protein Molecular Weight Marker
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100次
特别提示:包括蛋白分子量Marker(14~220kD)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:蛋白分子量Marker(14~220kD)
英文名称:Protein Molecular Weight Marker
产品货号:WE0280
产品规格:100次
本蛋白Marker由8条纯化好的蛋白质组成,其分子量范围是14.4 KD-220 KD(14.4 KD、20 KD、29 KD、35 KD、40 KD、66 KD、90 KD、220 KD),每种蛋白浓度为0.1-0.2 µg,进行聚*烯酰胺凝胶电泳时,染色后可以用来判断蛋白质的分子量。本产品仅适用于SDS-PAGE凝胶电泳考蓝染色,不适用于Western Blot检测。
注意事项:
1、仅适用于SDS-PAGE凝胶考马斯亮蓝染色,推荐使用8%-12%的聚*烯酰胺凝胶。
2、不推荐用于Native-PAGE。
3、不适用于Western Blot检测。
4、为避免反复冻融及污染,可将本产品分装后,-20℃保存。
操作步骤:
1、加样前在室温或者37℃-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、本产品推荐上样量为5μl,可根据凝胶的厚度和浓度大小调整。
实验图例:
12%的聚*烯酰胺凝胶电泳后,经ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂(#WE0290)染色的结果。
储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。
除了蛋白分子量Marker(14~220kD),,我公司还供应以下相关产品:
名称:SDS-PAGE分离胶配胶液
货号:BTN100868
规格:250mL
本产品专门用于配制非联续SDS-PAGE胶的分离胶,其浓度为4×,配胶时即开即用,非常方便。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
名称:RIPA裂解液(强中弱套装)
货号:YT612
规格:共150ml
本品是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。
RIPA裂解液(强中弱套装)含有RIPA裂解液(强)、RIPA裂解液(中)和RIPA裂解液(弱)各50ml,便于实验时探索不同的实验条件。
用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用百奥莱博的BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT036/YT037)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
产品组份:
RIPA裂解液(强)————50ml
RIPA裂解液(中)————50ml
RIPA裂解液(弱)————50ml
储存条件:-20℃,有效期一年。
名称:30%丙稀酰胺溶液(29:1)
货号:RFT065
规格:100ml
30%丙稀酰胺(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的质量比例为29:1。常用于配制*烯酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,常用于蛋白的分离。
储存条件:4℃,避光。
名称:1%封闭试剂(1×PBS)
货号:KFS072
规格:500ml
名称:端粒酶活性荧光实时定量PCR法检测试剂盒(人)
货号:KFS307
规格:50T
名称:TCEP·HCl
货号:SY0361
规格:1g
本品适用于凝胶电泳以及固相金属离子亲和层析(IMAC)的准备步骤,用作还原剂来破坏蛋白内或蛋白间的二硫键。也特别适用于马来酰亚胺偶联半胱氨酸残基反应,它能够预防半胱氨酸残基形成二硫键,也不会像DTT或β-ME,本身易与马来酰亚胺反应。RNA分离实验也常用于组织匀浆步骤。
三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP hydrochloride, TCEP·HCl)是一种不含硫醇基且无臭的化合物,广泛应用于生物化学和分子生物学中,用作多肽或蛋白质的二硫键还原剂。与其他类似的还原剂如二硫苏糖醇(DTT),β-巯基乙醇(β-ME)相比,TCEP·HCl 具有多种优点:1)无异味——实验台上使用即可,勿需通风橱;2)稳定性高——化合物本身结构的稳定性使得在操作、使用以及保存的过程中不需要做任何预防措施来避免氧化发生。不会挥发,室温反应即可。室温稳定,抗空气氧化。水溶性缓冲液,酸液以及碱液中稳定。不会与蛋白中的其他功能基反应;3)pH工作范围广——几乎溶于任何pH值的水溶性缓冲液,pH有效工作范围为1.5-9.0。直接溶于水后的pH值约为2.5;4)还原性强——对于大部分实验,5-50 mM TCEP·HCl即可提供足够的摩尔力,于室温条件作用几分钟来充分还原二硫键;5)兼容性广——不含有硫醇基,进行下游的巯基修饰实验如马来酰亚胺偶联不需要提前去除此还原剂。
中文别名:TCEP盐酸盐;三(2-酰乙基)磷盐酸盐;三(2-甲酰乙基)膦盐酸盐
英文别名:Tris-(2-carboxyethyl)-phosphine hydrochloride
CAS:51805-45-9
分子式:C9H15O6P·HCl
分子量:286.7
密度(Density):1.041 g/mL at 25 ℃
外观:白色晶体
熔点:177℃
溶解性:溶于水(50mg/mL)
纯度:>99%
储存条件:2~8℃保存,避光和避潮
结构式:
注意事项
1) 本品在磷酸盐缓冲液中,尤其是中性或碱性pH条件下,不是特别稳定。因此若要在PBS缓冲液中使用本品,工作液必须现配现用。
2) 本品在溶液中带电荷,因此不适用于等电聚焦实验。
3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验liteng1117 求助: 构建好了重组腺病毒进行蛋白表达,分子量是14kd,5%的浓缩胶70v,12%,或15%的分离胶110v,跑90min。湿转:100v,90min。封闭用5%的脱脂奶粉,封闭3h(因为背景深,以为封闭久会好些)。一抗1:3000,4度过夜,二抗1:5000,孵育1h,洗膜都是用TBST漂洗15min ×4次。但是显影后背景特别深,虽然可以看见目的条带,但还是有一些非特异性的条带出现,不知道是封闭出问题还是一抗浓度过高。
谱的Marker不一定每条都能看到的,特别是Mini Cell 。如果侧重大蛋白,那小的可能就已经跑掉了,不是质量不好哦。 ② 高分子量蛋白标准 通常在检测大分子量蛋白经常使用到高分子量蛋白标准, ③ 低分子量蛋白标准 在一般的蛋白电泳当中,更常用的是低蛋白标准分子量,除了有指示蛋白大小的作用以外,有时还可以用作粗略的定量。实验室用在一般蛋白电泳的低分子量蛋白标准中。 在低分子量蛋白标准这里还包括可特别小的蛋白标准,比如30kD以下蛋白
电泳过程同样很重要啊。电转的时候其实只要预染marker只要转到膜上了,那么你的相应分子量的目的蛋白也就转过去了,所以这就是你摸索条件的指示带。3、电泳过程中有推荐TRICINE-SDS-PAGE胶来进行电泳,会更有利于小分子量蛋白的分离,研读了一些文献,这个效果应该还是很肯定的,但是鄙人没有做过这种电泳,所以给不了什么经验,我最终还是用普通SDS-PAGE胶做出来的,不过鉴于我的蛋白分子量是11KD,那么假如你是几KD甚至更小分子量的多肽,那么还是建议你用TRICINE-SDS-PAGE胶来电
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