SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)销售

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百奥莱博专业生产销*(代"售")SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)销*(代"售")，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)销*(代"售")
规格：100μL
编号：BTN140234
产地：国产|进口
英文名：SYBR Green II nucleic acid dyes
SYBR Green II染料是一种高敏感的核酸染色试剂，可以对RNA或者是单链的DNA进行染色。不传统的EB等染料相比，SYBR Green II染料具有灵敏度更高，低毒安全，可用于杂交前RNA质量的检测而不影响的转膜等显著优点。

产品特点：
1. 灵敏度高，信噪比高，样品荧光信号强，背景信号低。可检测出100pg RNA或者单链DNA。不EB相比，SRBR Green II -RNA 复合物所激发的荧光是EB-RNA 复合物激发荧光的7倍。在变性琼脂糖/尿素胶等条件下，SYBR Green II的灵敏度但仍高于EB，使用300nm 透射光显影，非变性凝胶中检测核酸的灵敏度可以达到5×10-7克。
2. 操作简单，无须脱色或冲洗。使用方便，丌影响其它修饰酶作用。完全可以代替银染，同时还兊服了银染实验过程复杂、操作繁琐、费时的缺点。
3. SYBR Green II 丌是特异性的结合RNA或者DNA 单链，其对单链的结合效率是双链的约2倍。不其他大部分核酸染料丌同，SYBR Green II 不RNA 结合的荧光量子产率和荧光范围高于不DNA 结合。
4.荧光范围广，可使用多种成像设备观测。最大激发波长在497nm处，次激发波长在245nm 附近。发射波长在520nm处产生。
5.适用范围广，可适用于多种电泳分析、DGGE和SSCP 及RNA 质量分析实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
SYBR Green II染料检测核酸时即可用于预染也可电泳后染色。

1.预染实验
 取1μL 贮存液加入1ml TE缓冲液或者灭菌双蒸水中混匀，再加入1ml的6×loading buffer上样缓冲液混匀(此时溶液为1：2000 稀释，即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后直接上样。
2.电泳后染色
a.电泳后，在室温、避光的情况之下准备染色液。染色液要在塑料器皿中制备而丌要在玻璃器皿中，因为玻璃表层对该试剂有吸附作用。
b.染料取出后室温放置，恢复室温后简单离心混匀。
c.染色液使用1×TBE缓冲液进行1：10，000 稀释。如果是琼脂糖甲醛变性胶，用1×TBE做1：5000的稀释。由于SYBR Green II RNA染色液灵敏度高，所以要选用新鲜的1×TBE缓冲液进行稀释，以克缓冲液中残存的杂质产生背景，影响实验结果。注意：为提高染色的灵敏度，需要保证缓冲液的PH 值7.5-8 之间。
d. 把胶放在塑料的染色容器中，加入足够染色液使之覆盖整块胶。用铝箔遮盖或者是放在暗处避光。在染色之前没有必要先将胶中的变性剂如尿素和甲醛洗出来，因为本产品复合物发出的荧光在甲醛或者尿素存在时丌会猝灭。
e.在室温下轻轻摇晃凝胶。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶的最佳染色时间是10-40分钟，琼脂糖凝胶的最佳染色时间是20-40分钟。染色时间也可能随着凝胶的厚度和浓度变化。由于其荧光本底很低，凝胶染色后无需脱色。染色工作放在2-8℃ 避光保存，可以重复使用3-4次。
 注意：SYBR Green II RNA染色液丌影响RNA 向膜上的转移和northern中的后续实验。
3.染色胶显色和成像
 本产品所激发的荧光可以使用300nm和254nm光波照射，通过Wratten 15滤光片检测。注意：由于荧光本底较低，所以可以通过适当延长曝光时间的方法检测痕量的核酸。

SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)销*(代"售")正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·细胞核微量制备试剂盒
编号：BTN100601
英文名称：Nuclei Miniprep Kit
规格：50次
用高密度介质来分离动物软体组织(如肝脏、脾脏等)细胞核是目前主流的方法，它是由Chauveau于1956年发明，其原理是细胞核的密度较大，在高速离心条件下(40000g 1小时)可在高密度介质(2.2mol/l 蔗糖溶液)中沉降下来，从而达到与细胞质其它成分分开的目的。该方法能通过一步离心得到较高纯度的细胞核，得到广泛应用。本产品就是在Chauveau方法的基础上优化改进而来。

产品特点：
1．基于密度梯度分离，可有效去除细胞质及其他细胞器，得到的细胞核纯净。
2．加进*化*、*化*、*化*(代"*")等改变分离介质渗透压的物质，减少了细胞核的脆性，增加了细胞核的完整性。
3．精心调节了介质的pH，防止细胞核在分离过程中的聚集，还能保持细胞核的精细结构。
4．快速，整个操作过程仅需1小时即可完成(对一个样品而言)。
5．提供染色试剂，可以在普通光学显微镜下检测纯化的细胞核的纯度。
6．处理温和，得到的细胞核中的大部分蛋白质都具有活性，可以用于胶迟阻实验、酶活性分析细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究；也可用于超大片段DNA的纯化。
7．不但适用于动物和植物培养细胞，还能用于实体组织(能用Dounce或Potter 匀浆器匀浆的组织均可)。
8．一次微量提取足够处理0.1 克组织或10E7个培养细胞，本产品足够50次微量提取。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A成分一	100ml
溶液A成分二(干粉)	约20g
溶液B成分一	50ml
溶液B成分二(干粉)	约100g
细胞核染色液	1套
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一、准备工作：先将溶液A的成分二(干粉)全部加入到溶液A成分一(溶液)中，摇晃溶解后得到100mL溶液A。将溶液B的成分二(干粉)全部加入到溶液B成分一(溶液)中，摇晃溶解后得到50mL溶液B。4℃放置不能超过2 天，长期放置需要放-20℃。

二、微量细胞核分离(放量提取各试剂的用量可以按比例放大)：
1．对组织细胞：称取100～200mg 新鲜组织(如动物肝脏、脑、心肌和植物叶片等)，用自备的PBS或生理盐水洗净血水，滤纸吸干，用剪刀或刀片将其剪为碎块(最好大小为1cm3，过小反而不利于匀浆)放入小容量Dounce或Potter 玻璃匀浆器内。
2．对培养细胞：用自备胰酶按标准方法消化培养细胞，PBS 洗涤，800×g 5～10分钟离心收集细胞，计数。每次微量提取需要5×10E7个细胞，加入1.0mL预冷的溶液A重悬细胞，然后转移到小容量Dounce或Potter 玻璃匀浆器内
3．用Dounce或Potter 组织匀浆器在冰上破碎组织或细胞。如果用手动匀浆器，一般需要20～30次。如果用电动匀浆器，一般需要处理3-5次，每次5～10秒钟(转速为500r/min)。
4．将匀浆液转移到离心管中。如果匀浆液有可见的结缔组织和未破碎的组织块，可以用三层自备的纱布放在1.5mL离心管管口，将匀浆液过滤进入离心管。可取少量滤液涂在载玻片上制得涂片A，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
5．4℃，700-800×g 水平离心5-10分钟。细胞核沉淀在收集管底部，弃上清。可取少量上清液涂在载玻片上制得涂片B，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
6．加入0.5mL预冷溶液A重悬沉淀。用预冷的匀浆器(用前需要将表面的组织洗去)重悬沉淀。可取少量上清液涂在载玻片上制得涂片C，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
7．在水平型离心管中加入0.5mL预冷的溶液B，然后靠管壁慢慢加入上步得到的重悬液。
8．在4℃ 23000g离心30分钟，管底的沉淀即为细胞核。
9．小心吸弃上清液。注意：上清一般比较粘稠，最好倒立一段时间。
10．用0.5mL溶液A重悬沉淀。
11．在4℃ 1500g离心5分钟，吸弃上清，沉淀即为纯净的细胞核。可以直接使用，也可以加等体积的自备甘油，混匀后放液氮或-70℃保存。可取少量上悬浮液涂在载玻片上制得涂片D，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
12．用本方法一般可以从0.1g 肝脏组织中纯化到1-2×107个细胞核。如果后续试验是Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解细胞核后上样。

三、显微镜检测涂片，计算效率
1．将干燥后的A-D 四张涂片加入固定液固定15分钟，晾干。
2．Giemsa 染液染10分钟。
3．自备蒸馏水漂洗数秒，用滤纸吸干水。
4．用显微镜(40×)检查涂片，细胞核将呈紫红色，混杂的细胞质为浅蓝色碎片。根据每步细胞核的数量可以粗略估计回收效率。

疑难解答：
本说明书强烈建议用离心力g 而不是转速计算所需的离心速度，因为不同的离心机转子直径不同，即使是同一转速，其离心力也不同。如果只知道转速，可用下式计算离心力。
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G为离心力，一般以g(重力加速度)的倍数来表示；[rpm]２即转速的平方；
R为离心机转子的半径(单位为厘米)。


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·环孢霉素A
编号：BTN120687
英文名称：Cyclosporin A Solution
规格：1mL
本产品为浓度为10mg/mL的环孢霉素A溶液。环孢霉素A(Antibiotic S 7481F1；环孢多肽A ；环孢灵；山地明)，分子式: C62H111N11O12 ，分子量:1202.61 ，CAS号: 59865-13-3，环孢霉素A是由11个*基酸组成的环状多肽，它的第1、2、3、11位*基酸残基上可形成亲水性免疫抑制活性位点。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

·生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP )
编号：BTN151203
英文名称：Biotin-dUTP Solution
规格：25μL
本产品为浓度为10mg/mL的环孢霉素A溶液。环孢霉素A(Antibiotic S 7481F1；环孢多肽A ；环孢灵；山地明)，分子式: C62H111N11O12 ，分子量:1202.61 ，CAS号: 59865-13-3，环孢霉素A是由11个*基酸组成的环状多肽，它的第1、2、3、11位*基酸残基上可形成亲水性免疫抑制活性位点。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

·TCEP盐*(代"酸")膦
编号：BTN131055
英文名称：TCEP·HCl
规格：1g
本产品全名是Tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride)，中文名是Tris[2-羧乙基]盐*(代"酸")膦，它是高效、水溶性、无味的还原剂，其特点是选择性并彻底地还原最稳定的、水溶性的烷基二硫键。在室温、pH5.0的条件下，在五分钟内高效地还原。水溶性为310克/升。抵抗空气氧化；非挥发性并且对于蛋白中的其它基团无反应活性。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·人基因组DNA(女性)
编号：BTN131032
英文名称：Human Genomic DNA(Female)
规格：100μg
本产品为人基因组DNA，来源于多位匿名的捐献者，其中BTN131031为男性基因组DNA；BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量，90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。

储存条件：低温运输、4℃保存、有效期一年。


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·一站式生物素检测TUNEL试剂盒(DAB法)
编号：BTN81026
英文名称：One-Stop Biotin-Based TUNEL Kit
规格：10次
TUNEL就是末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口及末端标记(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)，它是一种高灵、敏度、快速检测细胞凋亡的方法。其原理是在发生凋亡细胞中会有大量的具有切口的DNA片段、或具有游离3´-OH端、长度是180-200bp倍数的DNA片段，TdT(末端脱氧核苷酸转移酶)可以以不依赖模板的方式进行标记，如参入荧光素、生物素或地高*(代"辛")等标记的dUTP，而正常细胞DNA几乎没有游离的3´-OH和切口，所以通过对标记物的显色反应和荧光显微镜或流式细胞仪检测就可以区分正常和凋亡的细胞。

试剂盒特点：
1．一站式，不需要额外准备专用的试剂(但客户还是需要自备常规的试剂，如水、PBS和细胞涂片所需试剂)。
2．高灵敏度，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，适合检测早期的细胞凋亡。
3．特异性高，只标记凋亡细胞，而不标记坏死细胞。
4．快速，整个操作过程仅需1-2个小时即可完成。
5．方便，一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。
6．适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)，本试剂盒足够处理十张切片使用。

试剂盒组成：

成分	规格
1×TdT Buffer	0.5ml
TdT酶(20U/μL)	10μl
蛋白酶K溶液(200μg/mL)	1ml
Streptavidin-HRP	50μl
DAB干粉	1mg
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、样本预处理(操作步骤仅供参考，本试剂盒不提供相关试剂)
下面所用的固定液、淬灭液和通透液均需要新鲜配制。固定液是溶于pH7.4的PBS中的、浓度为4%的多聚甲醛溶液；淬灭液是用甲醇将H2O2原液(30%)稀释到3%而得；通透液是溶于0.1%柠檬酸*中的、浓度为0.1%的Triton X-100溶液。

对贴壁细胞或细胞涂片
1．将自然晾干的贴壁细胞或细胞涂片浸入固定液中室温固定30-60分钟。为改善细胞的渗透性，可将固定好的样本放在70%乙醇中-20℃放置过夜。为防止样本脱落，可使用硅烷处理的载玻片或采用多聚赖*酸铺片。
2．用自备的PBS漂洗2次，每次5分钟。
3．浸入淬灭液中室温放置10分钟后，用PBS漂洗2次，每次5分钟。
4．浸入通透液中，冰上放置2分钟后，用PBS漂洗 2次，每次5分钟。用吸水纸吸干样本周围水分，待用。
对石蜡组织切片
1．将切片置于染缸中，用二甲*脱蜡2次，每次5分钟；再分别用100%、95%、90%、80%、70%的乙醇和PBS各洗一次，每次3分钟。
2．在每张切片上滴加100μl蛋白酶K工作液(10μl蛋白酶K溶液+90μlPBS缓冲液)并在室温放置15-30分钟以降解交联的蛋白和其他内源蛋白。注意：蛋白酶K工作液的用量和处理时间一般都需根据样品的不同而单独进行优化，此处的用量只供参考。蛋白酶K处理后不需要再淬灭内源蛋白酶。
3．用PBS漂洗4次，每次3分钟。此步不能省略，否则残留的蛋白酶K将会降解后面降压加入的TdT。用吸水纸吸干样本周围水分，待用。
对冰冻切片
1．将切片在固定液中室温固定20-60分钟，PBS洗涤2次，每次10分钟。
2．浸入淬灭液中室温放置10分钟后，用PBS漂洗两次，每次5分钟。
3．浸入通透液中冰上放置2分钟后，用PBS漂洗两次，每次5分钟。用吸水纸吸干样本周围水分，待用。
阳性对照样本
所有处理步骤跟样品一样，只是在最后还需在样品上滴加100μL自备的DNase I反应液室温放置10-30分钟。反应液含40mM Tris-HCl pH7.9，10mM NaCl，6mM MgCl2，10mM CaCl2和不同浓度的DNaseI(冷冻切片需3U/mL、石蜡切片需1500 U/mL、一般样本需10U/mL)。用PBS洗两次，每次5分钟。用吸水纸吸干周围水分后待用。

二、标记和显色反应
1．配制所需量的TdT酶反应液：将1μl TdT酶加入到 50μl 1×TdTBuffer中即可。TdT酶反应液需即用即配，不宜保存，否则酶会失活。
2．在除阴性对照外的每个样本上滴加50μl TdT酶反应液，加盖玻片后37℃避光放置60分钟。注意：加盖玻片可使反应液均匀分布，并避免其挥发。阴性对照只滴加50μl不含TdT酶的反应液。
3．用自备的PBS清洗3次，每次 5分钟，用吸水纸吸干样本周围残留液体。
4．将5μl Streptavidin-HRP溶液加入45μl PBS中，混匀后全部加在切片上并加盖玻片，37℃避光放置30分钟。
5．用自备的PBS清洗4次，每次5分钟，用吸水纸吸干样本周围残留液体。
6．滴加50μl 新鲜配制的DAB工作液(将1mg DAB干粉溶于1mL PBS中，取50μL与1μl 30% H2O2混合即得DAB工作液，剩余的DAB溶液可-20℃避光保存)，室温显色10分钟。
7．PBS漂洗4次，前3次每次1分钟，最后1次5分钟。
8．光学显微镜下观察、拍照。亦可用苏木素或甲基绿复染复染后再观察。

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