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外周血单个核细胞（PBMC）分离方法及注意事项

核细胞分离开来。 Ficoll密度梯度离心法是分离、纯化PBMC最常用的方法。Ficoll是蔗糖的多聚体，中性，平均分子量400000，当密度为1.2g/mL，未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜，故常用作PBMC分离的分离液。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分离液比重，离心后漂浮于分离液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分离液中。吸取分层液液面上的白膜层细胞，并进行适当的清洗，就可从外周血中分离到较高纯度的单个核细胞，即PBMC。 2    方法 1）  取新鲜抗凝全血

CRISPR/Cas9 gRNA文库筛选功能基因

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重视临床检验标本采集和处理

尽快送检（需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定，因为超过2h WBC形态会发生改变）。 （二）红细胞沉降率（血沉， ESR）测定标本 静脉采集枸橼酸钠（109mmol/L，即32.06g/L）抗凝血（枸橼酸钠抗凝管采血）。注意事项： 1.采血后立即上下颠倒混合5-10次； 2.单独采1管血,准确采血至2ml（抗凝剂：全血 = 0.4 ：1.6）； 3.采血后应尽快送检（必须2h内检测）。 （三）凝血检测（ PT、APTT 、 TT 、 FBG 、 DD ）标本 静脉采集抗凝血（最好