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- 2026年04月18日
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康朗生物
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g/mg
非常品质
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文献和实验做过 qPCR 实验的小伙伴都知道，稳定和精确的 qPCR 实验常和 PCR 的扩增效率有关。实验中，为了确保 qPCR 实验结果的准确，建议在实验前通过标准曲线的实验评估 PCR 的扩增效率。做标准曲线实验的时候，建议将标准品进行至少 5 个数量级的梯度稀释，每个梯度稀释液进行 3 次重复，然后将稀释的标准品进行 qPCR 实验，最后根据各样品的浓度（或未知浓度样品的稀释倍数）及相应的 Ct 值绘制标准曲线（图 1）。 图 1. 扩增曲线和标准曲线 其中，slope 是标准曲线的斜率，Eff
zgq8888 求助： 我想做一个QPCR检测肝癌组织及正常组织的一个基因表达，我是用哪个做标准品建立标准曲线；另外关于人的内参NAPDH的引物序列，不同文献不同，我应该怎样选择。谢谢 zjubell 你要做绝对定量还是相对定量？ 既然你提取用内参，那应该就是相对定量了 所以不需要标准品做标准曲线。但你需要对你的两对引物进行扩增效率测试 也是10倍稀释，就拿cDNA即可。 如果两个梯度间
，比如： 1.It seems there are many wrong metabolite identifications； 2.How the authors identify the isomers because are no standards described in the manuscrip； 3.Please add information of MS2 and mass error in Table； …… 2.避免审稿小技巧—数据鉴定的标准化 防患于未然，把数据鉴定标准化、明确化和数据化显得尤为重要，在文章中适当呈现，是避免一系列审稿
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