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- 2025年07月15日
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- 细胞类型：
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- 供应商：
上海博湖
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43
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- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 年限：
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- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
- 免疫类型：
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- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病：
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- 组织来源：
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- 规格：
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细胞描述
大鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒内脏是指在体腔内，借管道直接或间接与外界相通的器官的总称。主要包括人体胸腹部内脏器官的分布：肝脏、胆囊、胃、肾、小肠、脾、直肠、十二指肠、胰、输尿管、卵巢、膀胱、子宫。其中，大鼠内脏脂肪细胞主要存在于结缔组织中，能够合成和贮存脂肪。成熟的脂肪细胞呈圆形，胞浆内富含脂滴。脂肪细胞在脂类代谢，能量平衡以及抵抗炎症等方面起重要作用，与肥胖，高血脂、糖尿病、乳癌等多种生理疾病密切相关。 利用本公司试剂盒中提供的内脏组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的内脏组织能使得内脏组织中脂肪细胞的一些功能特性发生改变，从而将脂肪细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养大鼠内脏脂肪细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的脂肪原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的内脏脂肪细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠内脏脂肪细胞组织解离液（3×1ml） （2）大鼠内脏脂肪细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠内脏脂肪细胞成纤维抑制剂（1ml（500X）） （4）大鼠内脏脂肪组织洗液（5 x 100 ml） （5）大鼠内脏脂肪细胞生长因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （6）大鼠内脏脂肪细胞基础培养基（5 x 100ml） （7）大鼠内脏脂肪组织预备液（1 x 100 ml） （8）大鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒使用说明书
细胞传代：
大鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏：
1. 大鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
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大鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换；而是每 2 到 3 天加料一次，直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞，然后继续培养扩增，或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞，将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短
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文献和实验相关专题 细胞培养基的配制 Cambrex公司最近推出一款改良后新型的Poietics(TM)前脂肪细胞生长培养基试剂盒(Preadipocyte Growth Media Kit，PGM-2)，此培养基用于培养人类前脂肪细胞用于肥胖、胰岛素抗性、II型糖尿病、验证和相关心血管疾病研究的。 Poietics的PGM-2培养基比起其它商业化的培养基能够在较短的时间内(十天)让细胞更好的增殖和分化。在培养细胞过程中不需要更换培养
吸管反复吹打使组织块分散，然后通过孔径25μM（200目）的筛网过滤，收集滤液和未过滤的组织块。5、将滤液以600g离心5分钟弃上清，加入原代培养的基础培养基制成细胞悬液。6、将未滤过的组织按照上述过程再处理一次，将俩次获得的细胞悬液混匀计数，按照104个/cm2的密度接种于培养瓶里，于37度，5％CO2培养箱中培养。接种12－16小时基本贴壁。在增殖状态下的前脂肪细胞可以使用胰蛋白酶消化的方法传代，并且可以冻存和复苏。
，收集滤液； ⑤ 将最后得到的滤液离心（700g，7—10min）。吸弃漂浮的脂肪细胞和消化液； ⑥ 用培养液a清洗细胞，离心（700g，7min）。将细胞团制成悬液，再离心。最后，将细胞沉淀用培养液a重新制成细胞悬液。 3. 原代培养； ① 用培养液a调节细胞密度。将细胞以1.5×104个/cm2 的密度接种于培养板中； ② 24h后，用DW培养液彻底清洗细胞，除去培养物中残留的胎牛血清和未贴壁的细胞（主要为红细胞）； ③ 换入培养液b，在37℃、5%CO2 培养箱中培养
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