一步法免疫组化试剂盒(兔、鼠通用)

特别提示：包括一步法免疫组化试剂盒(兔、鼠通用)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：一步法免疫组化试剂盒(兔、鼠通用)
产品货号：KFS029
产品规格：60 片

本试剂盒可用于免疫组织化学方法以显示抗原的分布。适用于常规福尔马林固定石蜡包埋切片、冰冻切片、培养固定的细胞涂片，以及新鲜制备的血涂片等。我司即用型一步法免疫组化检测试剂盒与常规免疫组化染色试剂盒相比，具有高灵敏性、高特异性及操作简便的优点。多个HRP聚合物直接与二抗相连，大大放大了抗原抗体结合的信号，减少了孵育步骤，孵育时间缩短为10分钟。试剂盒不含有生物素，完全避免了内源性生物素造成的背景影响。试剂盒提供的DAB显色试剂为增强型显色试剂，且自带稀释液，避免了由于水质的不同对DAB显色造成的影响；与一般DAB试剂相比，增强型的稳定性显著提高，显色更醒目，敏感性更高。

注意事项：
1. 检测标本时需同时做阴性对照和阳性对照。
2. DAB 是一潜在致癌物，使用时请注意自我防护。
3. DAB 显色液需现用现配，避光放置，且在30 分钟内染色。
4. 用滴瓶加液时，每一滴的体积为50μL。

除了一步法免疫组化试剂盒(兔、鼠通用),，我公司还供应以下相关产品：



名称：CHAPS
货号：BTN131043
规格：5g
CHAPS全名是(3-[(3-Cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulfonate)，中文名是3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐，多一个羟基就是CHAPSO，全名是3-[(3- 胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-2- 羟基-1- 丙磺酸盐。它们的特点是能够破坏非特异性蛋白相互作用。与非离子型去垢剂相比引起蛋白聚集的几率更小。电中性并且不会引起变性。可以通过透析去除。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

名称：即用型免疫组织化学SP试剂盒(Rabbit)
货号：KFS033
规格：300 片

名称：kFluor350标记抗兔免疫荧光染色试剂盒
货号：KFS038
规格：300T
适用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时，就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。含kFluor350标记的山羊抗兔IgG (H+L)抗体，可以用于检测兔来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的蓝色。

kFluor350（Ex/Em：346nm/442nm）是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。kFluor350的荧光光谱与DAPI和Hoechst比较接近。

本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。

本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。

本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。
4. 建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
6. 需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂，需自备盖玻片和载玻片。

储存：2-8℃，避光，有效期6个月

名称：4％多聚*醛
货号：QN1252
规格：100mL|500mL
多聚*醛是免疫组织化学(IHC)和免疫细胞化学(ICC)研究中zuì常用的固定剂之一。该固定剂较为温和，能很好地保存组织的抗原性和细微结构，适于组织标本和细胞片的较长期保存，非常适合组织和细胞的光镜免疫化学研究。

本产品为4%多聚*醛的PBS溶液，可直接用于组织和细胞固定。若需使用其他低浓度多聚*醛，可使用0.01M PBS按比例稀释。

使用说明：
组织固定：室温或4℃浸泡固定2-24h，用缓冲液漂洗后即可树脂包埋用于组织切片。
切片固定：室温或4℃固定10min-2h，视切片厚度而定，用缓冲液漂洗后即可用于染色。
细胞固定：室温或4℃固定10-30min，用缓冲液漂洗后即可用于染色。

注意事项：
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品不含防腐剂，不宜室温或4℃长期保存，请勿反复冻融。

储存条件：-20℃

名称：细胞膜/胞浆/核膜蛋白分步提取试剂盒
货号：HR8005
规格：50T/100T
细胞膜蛋白/胞浆蛋白/核膜蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中分步提取细胞膜蛋白/胞浆蛋白/细胞核膜蛋白/核内蛋白。提取过程简单方便，可在2小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

储存条件：蛋白酶抑制剂-20℃保存；磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白提取液2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
1．旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3．蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
蛋白提取步骤：
1．提取液制备：每400μl冷的蛋白提取液A/D中加入分别加入2μl蛋白酶抑制剂混合物和2μl磷酸酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取5-10×106个细胞①，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，用细胞刮刀收集细胞。(组织样本50-100mg 剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨)，冰上静置5分钟，小心将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。在4℃，500g条件下离心2-3分钟，弃上清。)
3．用冷PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．每5×106个细胞中加入400μl冷的蛋白提取液A，混匀后，在4℃条件下用试剂盒所配针筒反复吸吹细胞，使细胞完全破裂。
5.在4℃，1000g条件下离心5分钟。
6．快速将上清(I)吸入另一预冷的干净离心管，在沉淀中加入200μl冷的提取液B，高速涡旋振荡15秒。
7．将混匀的提取液B 置2-8℃振荡1-2小时，至沉淀充分裂解，沉淀明显减少。
8．37℃水浴10分钟，37℃下②1000g-2000g 力离心5分钟，此时溶液分为两层(对着光线看)，上层为核内蛋白，下层是核膜蛋白约为20-40μl。小心移除上层，用1-2倍体积的提取液D溶解下层即为细胞核膜蛋白。
9.在步骤6中所得到的上清(I)中加入5μl提取液C，充分混匀。37℃水浴10分钟。
10．37℃下② 1000g离心3分钟，此时溶液分为两层(对着光线看)，上层是胞浆蛋白部分，下层是细胞膜蛋白部分约为40-50μl。
11．将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白。
12．用80-200μl冰冷的提取液D溶解步骤10中的下层部分，即得细胞膜蛋白。
13．将上述蛋白提取物定量③后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验④。
注：
①细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
② 必需保证在37℃左右下离心，至少确保30℃以上。无可控温的离心机时，用常温的离心机在室温离心即可，适当缩短离心时间至2-3分钟。
③ 建议用BCA 法进行蛋白定量。
④蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。