植物原生质体制备试剂盒

特别提示：包括植物原生质体制备试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：植物原生质体制备试剂盒
英文名称：Plant protoplast preparation kit
产品规格：50T/100T

植物原生质体制备试剂盒提供全*(代"套")试剂，适用于从各种植物样本制备原生质体。此试剂盒提供了一个系统，维持原生质体是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离原生质体，而绝少交叉污染。
本试剂盒适用于各种植物样本原生质体的制备，也可以用于常见的各种绿藻、金藻、硅藻、甲藻、螺旋藻等单细胞、多细胞、丝状体、多核体等形态真核类藻类原生质体制备。
本试剂盒提取的原生质体组分仍保持其生化功能，适合各种下游分析。

储存条件：提取液A和C 2-8℃保存；提取液B -20℃保存。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
试剂盒以外自备试剂耗材和仪器：
● PBS ● 吸头、离心管 ● 移液器 ●冰盒 ●离心机 ● 涡旋振荡器 ●冰箱

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

1．提取液制备：
每1000μl冷的提取液A中加入10μl提取液B，混匀后置冰上备用。
【注】：
● 根据需要处理的样品数量准备提取液，提取液B 不可以一次全部加入提取液A。
2．取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的100-200mg 鲜嫩植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎，加入500μl提取液A 充分混匀。
【注】：
● 加入提取液A 后可以用匀浆机/匀浆器适当匀浆处理。
●培养细胞1000g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞后用PBS 洗涤2次，然后直接加入提取液A重悬。
● 大约每300μl细胞压积中加入1ml 提取液A。
3．将细胞悬液置振荡器上37℃-55℃或室温振荡1-3小时。
【注】：
● 不同类型的植物样本需要处理的时间差异较大。
● 部分细胞壁较厚的植物类型可能需要处理更长时间。可以延长至12小时以上过夜处理以提高原生质体得率。
4．离心力1000g离心5分钟，收集沉淀，即为原生质体。
5．用PBS 洗涤原生质体一次。
6．在原生质体沉淀中加入1ml试剂C重悬原生质体，混匀。
【注】：
● 也可用其他适当缓冲液重悬或直接用于下游实验。
7．将上述原生质体样本置2-8℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。