- ￥348
- 雅酶
- YY101
- 2026年01月24日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
两年
- 保存条件：
避光4~25℃
- 规格：
100mL
Total RNA Isolation Reagent
本产品常温运输；避光保存于4~25℃，保质期24个月。
货号规格
goodYY101L 100 mL
goodYY101L 100 mL×5
产品特点
g
d色彩鲜艳——便于区分水相和有机相的分界面，方便吸取上清；g
d高性价比——产品质量丝毫不逊色于进口同类产品，而价格仅为其一半左右。产品简介
good本产品适用于从细胞和组织中快速分离RNA/DNA/蛋白质。整个实验操作简单省时，所提取的RNA纯度高，可用于Northern Blot、PolyA RNA富集、体外翻译、RNase保护分析、反转录等下游实验。本品含有苯酚，如不慎接触皮肤，应立即用大量流水冲洗。
使用说明
good请确保您所使用的离心管、移液器吸头以及其它器皿未被RNase污染。金属和玻璃制品可在200℃烘烤2 h以上。塑料制品和水可用0.01%的DEPC水浸泡过夜，高压灭菌。所有溶液应使用DEPC处理后的水配制。
good分离RNA
goooood1. B．贴壁培养的细胞 吸去培养板中的培养基，按每10 cm2(相当于一个3.5 cm直径的培养皿或6孔板的一个孔的面积)培养面积直接加入1 mL总RNA提取试剂。晃动培养板，使总RNA提取试剂反复流过培养细胞的表面，待所有贴壁的细胞裂解后，将裂解液转移到一个新的1.5 mL的离心管内。
goooood1. C．悬浮培养的细胞 离心收集细胞(无需洗涤细胞，洗涤过程极有可能会使RNA降解)，按每5~10×106个动物、植物、酵母细胞或1×107个细菌细胞加入1 mL总RNA提取试剂，反复吹打，使细胞分散裂解。一些酵母细胞或细菌细胞可能需要用匀浆仪处理。
goooood2. 裂解后的匀浆液于室温放置5 min，使核酸和蛋白质复合体完全分离；
goooood3. 可选：若样品中含有较多组织碎片或多糖等不溶物质(常见于抽提植物组织RNA时)，可于4℃ 12,000×g离心10 min，取上清液进行下一步操作；
goooood4. 按每使用1 mL总RNA提取试剂加入0.2 mL氯仿，剧烈震荡混匀15 s，室温放置3~5 min；
goooood5. 于4℃ 12,000×g离心15 min。样品将分为三层：下层为绿色有机相，上层为无色水相，中间层为白色的DNA和蛋白质；
goooood6. 吸取上层水相，转移到一个干净的离心管中。加入等体积异丙醇，室温放置10 min沉淀RNA。小分子RNA(如microRNA等)在异丙醇沉淀过程中会大量丢失。因此如希望回收microRNA等小分子RNA，可改用2.5倍体积乙醇，于-20℃沉淀30 min以上。如需同时纯化DNA和蛋白质，请保留有机相和中间层；
goooood7. 于4℃ 12,000×g离心10 min，收集沉淀。离心后，管底和管侧壁可见白色或半透明状RNA沉淀。弃上清；
good分离DNA
goooood1. 在上述 分离RNA 第6步的有机相和中间层中，按每使用1 mL总RNA提取试剂加入0.3 mL无水乙醇，混匀，室温放置3 min，于4℃ 12,000×g离心5 min；
goooood2. 将上清转移到一个新的离心管内，以备后续分离蛋白。DNA沉淀用含10%乙醇的0.1 M柠檬酸钠溶液充分洗涤。按每使用1 mL总RNA提取试剂加入1 mL洗涤液，室温放置30 min，于4℃ 12,000×g离心5 min，弃上清，重复一次；
goooood3. 用75%乙醇洗涤沉淀。按每使用1 mL总RNA提取试剂加入1.5 mL 75%乙醇，室温放置10~20 min，期间不时颠倒混匀。于4℃ 12,000×g离心5 min，弃上清；
goooood4. 室温晾干DNA沉淀。用8 mM的NaOH溶液溶解DNA；
goooood5. 将DNA溶液pH调整至7.5。按每1 mL 8 mM NaOH溶液加入160 µL 0.1 M的HEPES溶液。
good分离蛋白质
goooood1. 取沉淀DNA后的上清，按每使用1 mL总RNA提取试剂加入1.5 mL异丙醇，室温放置10 min，于4℃ 12,000×g离心5 min，弃上清；
goooood2. 用含0.3 M盐酸胍的95%乙醇洗涤蛋白质沉淀。按每使用1 mL总RNA提取试剂加入2 mL洗涤液，室温放置20 min，于4℃ 7,500×g离心5 min，弃上清。重复两次后，用2 mL无水乙醇再洗一次；
goooood3. 晾干沉淀，用1% SDS溶液溶解蛋白沉淀，必要时可于50℃加热助溶。离心，弃不溶物。上清即可用于Western Blot分析。
注意事项
good1. 本品含有苯酚，如不慎接触皮肤，应立即用大量流水冲洗；
good2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
good3. 本产品仅限科研使用。
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文献和实验粉末状后再按每管100 mg的量分装到1.5 ml离心管中，每管再加入600 µl含β-巯基乙醇的植物总RNA提取液）。 加入600 µl Buffer EX，用力混合均匀，13000 rpm离心10分钟。 小心吸取350 µl上清，转入一个洁净的1.5 ml离心管中。 在上清液中加入等体积的RNA沉淀液，盖上管盖混合均匀，13000 rpm离心5分钟。 弃上清，低速离心数秒使管壁上的上清液聚集到管底，用200 µl吸头吸尽残留的上清液。 加入1 ml 70%乙醇，盖上管盖，旋涡震荡悬浮
在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase 的作用。 1. 提取组织RNA 时，每50～100mg 组织用1ml Trizol 试剂对组织进行裂解；提取细胞RNA 时，先离心沉淀细胞，每5-10 �106 个细胞加1ml Trizol 后，反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞； 2. 将上述组织或细胞
人S 蛋白100B (S-100B) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中S 蛋白100B (S-100B) 的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 S 蛋白 100B (S-100B) 水平。用纯化的人 S 蛋白 100B (S-100B) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 S 蛋白 100
