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上海研生
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39
- 英文名:
MouseBrain:NormalCerebellarGranuleCells
- 生长状态:
贴壁/悬浮
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常温运输/干冰运输
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上皮样/成纤维样/其它
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1.2ML/1.5ML
小鼠小脑颗粒细胞【MouseBrain:NormalCerebellarGranuleCells】图片细胞培养简介:
什么是细胞培养?细胞培养是从动物或植物中取出细胞,然后使其在合适的人工环境中生长。这些细胞可于培养前直接从组织中取出并采用酶或机械方法进行解离,或者也可来自已经建立的细胞系或细胞株。
1)原代培养:
原代培养是指将细胞从组织中分离后,使其在合适的条件下增值直到占据所有可用基质(即:达到汇合状态)的培养阶段。在此阶段。必须将细胞转移到新的容器中并更换新鲜培养基,从而对细胞进行传代培养,为其提供更多继续生长的空间。
2)细胞系:
首次传代培养后,原代培养物即被称为细胞系或者亚克隆。来自于原代培养的细胞系寿命有限(即:有限细胞系,见下文),随细胞的传代,生长能力最强的细胞会占据优势,最终导致细胞群体在基因型和表型上达到一定程度的均一性。
3)细胞株:
如果将细胞系的一个亚群通过克隆或者其他方法从培养物中明确地选择出来,则次细胞系就成为一个细胞株。与亲代细胞系起始时相比,细胞株往往会获得其他一些遗传学改变。
培养环境:
细胞培养的一大优势在于能够控制细胞生长的物理化学环境(即温度、pH值、渗透压、O2和CO2压力)和生理环境(即:激素和营养素浓度)。除温度外,培养环境均由生长培养基控制。
虽然细胞培养的生理环境不如其物理化学环境明确,但是通过对血清成分更好地了解、确定细胞增殖所需的生长因子以及更好地了解培养过程中的细胞微环境(即:细胞间相互作用、气体扩散、细胞-基质相互作用),现在可以采用无血清培养基进行一些细胞系的培养。
小鼠小脑颗粒细胞【MouseBrain:NormalCerebellarGranuleCells】图片
产品描述:小脑颗粒细胞是脑中数量最多的神经元,在人脑中大约为1010亿个。小脑颗粒细胞的轴突是沿冠状轴分布的平行纤维,正是这种排列保证了兴奋的单向传导,这是小脑功能理论中的关键假设。小脑颗粒细胞通过g-氨基接受戈尔吉细胞的抑制性突触的信息传入。公司提供的小鼠小脑颗粒细胞,采用胰酶消化制备而来。细胞的培养采用公司专利产品小鼠小脑颗粒细胞培养试剂盒(MouseBrainPrimaCell™:NormalCerebellarGranuleCellsCatNo.3-4442)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,小鼠小脑颗粒细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基;2、说明书及注意事项;3、公司售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
小鼠小脑颗粒细胞【MouseBrain:NormalCerebellarGranuleCells】图片一、所需仪器:
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
恒温水浴锅
小鼠小脑颗粒细胞【MouseBrain:NormalCerebellarGranuleCells】图片二、所需试剂:
胎牛血清(FBS)
无菌1×PBS pH=7.2
完全培养基
三、所需耗材:
离心管(15ml、50ml)
T-25细胞培养瓶
一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)Collagen III (Anti--Collagen Type III ) 0.5mg
ATP敏感性钾通道亚基kir6.2抗原Kir6.2 peptide 0.5mg
分泌素受体(抗原)Secretin receptor 0.5mg
磷酸化组蛋白去酰化酶5抗体 英文名称:phospho-HDAC5 (Ser498) 0.1ml
细胞角蛋白14抗原CK14/17/42/10 peptide 0.5mg
DMBT1抑癌基因抗原DMBT1 (Deleted in malignant brain tumor 1) 0.5mg
5-羟色胺受体2B抗体 英文名称:5-HTR2B 0.1ml
生长抑素受体5抗体 英文名称:Somatostatin Receptor 5 0.1ml
信号通路WNT8A抗体 英文名称:Wnt8A 0.2ml
Alexa Fluor 647标记的兔抗人分泌型IgARabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 647 0.1ml
磷酸化调节染色体组装激酶1抗体 英文名称:Phospho-TLK1(Ser695) 0.1ml
小鼠小脑颗粒细胞【MouseBrain:NormalCerebellarGranuleCells】图片 Taurine 107-35-7 牛磺酸(>98.5%,JP ) 质量规格:>98.5%,JP
Levofloxacin Hemihidrated 138199-71-0 左氧氟沙星 质量规格:>98.5%,USP34,BR,可用于细胞培养
Asiatic acid 464-92-6 积雪草酸(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Formestane 566-48-3 福美斯坦 质量规格:>99%
6-Hydroxy Chlorzoxazone 1750-45-4 6-羟基氯唑沙宗 质量规格:美国进口
Sodium oxalate solution for volumetric analysis 62-76-0 草酸钠容量分析用溶液标准物质 质量规格:分析标准品,99.96%
Aliskiren Hydrochloride 173399-03-6 盐酸阿利克仑 质量规格:美国进口
Riluzole-13C,15N2 1744-22-5(unlabeled) 利鲁唑-13C,15N2 质量规格:美国进口
Pneumocandin B0 135575-42-7 纽莫康定B0(肺囊康定) 质量规格:>95%
Ceftazidime-d5 72558-82-8 (unlabeled) 头孢他啶-d5 质量规格:美国进口
N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 133-07-3 灭菌丹标准溶液(10μg/ml,u=6%) 质量规格:10μg/ml,u=6%
Vincristine Sulfate 2068-78-2 硫酸长春新碱/硫酸醛基长春碱(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠小脑颗粒细胞【MouseBrain:NormalCerebellarGranuleCells】图片一、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;
收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
二、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:
1. 未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水,喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先用枪头把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。
2. 超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:
1) 弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;
3) 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中,按要求分瓶。
三、如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
小鼠小脑颗粒细胞【MouseBrain:NormalCerebellarGranuleCells】图片四、细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
(1)细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;
(2)冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;
(3)存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
(4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
(5)视具体情况而定。
五、细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(4)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(5)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(6)视具体情况而定。
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文献和实验睡多久睡多香由啥决定?牛津大学新研究颠覆传统认知,为睡眠障碍
的齿状回颗粒细胞,因为这两种细胞类型参与睡眠震荡调节。前者参与调控非快速动眼期的震荡调节,后者负责快速动眼期海马 θ 波的产生。通过观察野生型小鼠 24 小时内初级运动皮层局部场电位(local field potential, LFP)和多个神经元活动(Multiunit Activity, MUA),并结合脑电图 EEG 和肌电图 EMG,发现神经元在从关-开的转变中 V 层锥体神经元参与启动神经元放电过程。图片来源:Nature neuroscience随后研究团队通过构建条件性敲除 SNAP
摇动(Swaying,Sw):Sw/Sw鼠主要症状是躯体共济失调和四肢强直。小脑前蚓部大多缺失,下丘脑向外侧错位,上丘脑直接与小脑白质混为一体。尽管小脑皮质被破坏,但浦表野氏细胞和颗粒细胞之间的组织学关系基本正常。 ⑸摇晃(Weaver,Wr):Wv/Wv鼠出生后8~10天可出现步态不稳,倒下和试图恢复平衡时身体和四肢有颤抖表现。当鼠受刺激或兴奋时跳跃较高(一般可达25cm)。小脑的颗粒细胞几乎完全缺乏。发现于C57BL/6J小鼠。 (二)髓鞘异常
层细胞很少,分子层狭窄。 ⑷摇动(Swaying,Sw):Sw/Sw鼠主要症状是躯体共济失调和四肢强直。小脑前蚓部大多缺失,下丘脑向外侧错位,上丘脑直接与小脑白质混为一体。尽管小脑皮质被破坏,但浦表野氏细胞和颗粒细胞之间的组织学关系基本正常。 ⑸摇晃(Weaver,Wr):Wv/Wv鼠出生后8~10天可出现步态不稳,倒下和试图恢复平衡时身体和四肢有颤抖表现。当鼠受刺激或兴奋时跳跃较高(一般可达25cm)。小脑的颗粒细胞几乎完全缺乏。发现于C57BL/6J小鼠。 (二)髓鞘异常
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