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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
180
- 英文名:
DAPI Dying Solution
- 保质期:
六个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
10ml
特别提示:包括DAPI染液(即用型)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DAPI染液(即用型)
英文名称:DAPI Dying Solution
产品货号:SY0496
产品规格:10ml
本产品浓度已经过优化,确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的DAPI,请选购DAPI(SY0495)或DAPI染液(5mg/ml)(SY0496)。
DAPI,也称DAPI dihydrochloride,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂,它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜,但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。
CAS:28718-90-3
分子式:C16H17Cl2N5
分子量:350.25
储存条件:4℃,有效期六个月
注意事项
1)DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
除了DAPI染液(即用型),,我公司还供应以下相关产品:
名称:细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT法)
货号:YT122
规格:500次
本试剂盒被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结 晶状的深紫色产物formazan。在特定溶剂存在的情况下,可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附 近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方,无需去除原有的培养液,可 以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。从而避免了由于去除培养液时formazan被部分去除而引起的误差。本试剂盒本底低,灵敏度高,线性范围宽,使用方便。
试剂盒组份:
MTT——————25mg
MTT溶剂——————5ml
Formazan溶解液——55ml
注意事项:
1. 由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问 题。一方面,由于96孔板周围一圈zuì容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS,水或培养液;另一方面 ,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
2. MTT溶剂在低温情况下会凝固,使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻 至全部融解后使用。
3. MTT配制成溶液后为黄色,需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色 变为灰绿色时,请勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解 后使用。
4. Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解,并且必 须在全部溶解并混匀后使用。
储存条件:4℃,有效期一年。
名称:Caspase-3活性检测试剂盒(分光光度法)
货号:SNM513
规格:100T|50T|20T
名称:DNA ladder 1000
货号:SNM520
规格:60T
名称:TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(荧光及显色法,细胞样本)
货号:SNM531
规格:50T|20T
名称:TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(显色法,石蜡切片)
货号:SNM537
规格:50T|20T
名称:XTT细菌增殖及细菌毒性检测试剂
货号:KFS318
规格:500T|1000T
XTT(二甲氧唑黄)是一种类似于MTT 的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,活细菌线粒体中存在与辅酶Ⅱ相关的脱氢酶,可将黄色的XTT 还原成水溶性的橘黄色的甲月赞。生成的甲臜能够溶解在组织培养基中,不形成颗粒,可直接用酶联免疫检测仪检测定吸光值。
注意事项
1. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待检测体系中存在较多的还原剂,例如一些抗氧化剂会干扰检测,需设法去除。
2. 如果待测溶液有还原性,测定不含细菌,但含有XTT 的待测溶液在450 nm 处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入XTT ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细菌两次,然后加入新的100 μl 培养基和20 μl XTT 工作液进行检测。
3. 用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡,否则会干扰测定。
4. 为保证您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作方法
1. 96 孔板加入细菌100μL/孔(约1×104),置37℃ 5%CO2 细菌培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃,含5% CO2 空气及100%湿度的细菌培养箱中孵育适当时间。
4. 向各孔中加入20 μl 的XTT 工作液。
5. 37℃下孵育1~4 小时。
6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。
结果分析
1. 细菌的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加XTT 工作液,无细菌)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加XTT 工作液,无细菌),各重复孔的OD 值取均数±SD。细菌的存活率以T/C%表示,T 为加药细菌的OD 值,C 为对照细菌的OD 值。细菌存活率% =(加药细菌OD/对照细菌OD)×100
2. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
名称:Hoechst 33258 染液(即用型)
货号:SY0498
规格:10ml
本系列产品均以溶液形式提供,其中Hoechst 33258 染液 (1mg/ml)(SY0562)为特定浓度的产品,其浓度为1mg/ml。用于细胞核染色时,推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。Hoechst 33258染液(即用型)(SY0498)为浓度经过优化的产品,确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用粉末状该产品,可选购Hoechst 33258(SY0497)。
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。可用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可用于活细胞或组织的细胞核染色。
中文名称:二苯甲亚胺, 三氯化氢 2-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌*基)-2,5-二-1H-苯并咪唑
英文名称:2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride;bisBenzimide H 33258; HOE 33258
分子式:C25H24N6O·3HCl
分子量:533.88
CAS:23491-45-4
纯度:≥95%(HPLC)
储存条件:-20℃,有效期12个月
结构式
使用方法
对于1mg/ml的Hoechst33258在使用时需用PBS或合适的缓冲液配制成0.5-10μg/ml的染色液。
1. 对于固定的细胞或组织
1) 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258 染色。
2) 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液,并混匀。室温放置 3~5分钟。
3) 吸除 Hoechst 33258 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2~3 次,每次3~5 分钟。
4) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。观察细胞凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。激发波长350nm,发射波长460nm。
2. 对于活细胞或组织:
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在适宜于细胞培养的温度培养 20~30 分钟。
c) 弃染色液,用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验DAPI 染色 1.原理DAPI为4’,6二脒基-2-苯吲哚(4’,6―diamidino-2―phenylindole)能与双链DNA小槽,特别是AT碱基结合,也可插入少于3个连续AT碱基对的DNA序列中。当它与双链DNA结合时,荧光强度增强20倍,而与单链DNA结合则无荧光增强现象,因此是一种简易、快速和敏感地检测DNA的方法。DAPI的荧光强度虽较Hoechst低,但荧光稳定性优于Hoechst;其特异性较溴化乙啶(ethidlium bromide,EB)和碘
茜素红S中文名称: 茜素红S英文名称:alizarin red S; sodium alizarin sulfonateCAS: 130-22-3分子式: C14H7NaO7•;H2O分子量: 360.28中文别名: 9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐; 茜素红;(3)茜素磺酸钠 ;茜素S ;酸性媒介茜素红;酸性媒介红S-80(Acid Mordnat Reds-80);C.I.媒介红3(C.I.Mordant Red 3)。性质:橙黄色的针状体。溶于水,微
DAPI Staining To visualize DNA, incubate fixed samples with 100 ng/ml 4',6'-diamidino-2-phenylindole hydrochloride (DAPI) in PBS for 30 min. Rinse 3x with PBTw. Materials PBS: Sambrook et al. (Molecular Cloning ). PBTw
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