鼠抗人甲胎蛋白

Mab mouse×human
ELISA、IHC、GOLD （marking）
IgG2a
Clone:2B008A02
Affinity Purified Save;-20℃
Specificity:Recognizes alpha fetoprotein (AFP) at 70kDa.Does not react with other onco-fetal antigens or serum ablumin. Species Reactivity: Human, Dog and Pig.Does not react with bovine,cat,mouse,and rat.
单克隆抗体，鼠抗人，应用于ELISA、HIC 、GOLD（标记）
IgG2a亚型，克隆号：2B008A02 亲和纯化 -20℃保存
特异性：识别分子量7万的甲胎蛋白，不与其他抗原、血清白蛋白反应。种属反应：和人类、狗、猪有反应，和牛、猫、鼠、大鼠没有反应。

提纯实验
1．材料
单克隆抗体制备流程
(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
20mMol/LNaCl
(2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
40mMol/LNaCl
(3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
80mMol/LNaCl
(4)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
(5)饱和硫酸铵液
(6)DEAE—纤维素柱
2．操作方法
（1）小鼠腹水用冷PBS液稀释4倍后，于1.00×105转离心30min，去沉淀。
（2）在4℃于上清中缓缓滴加饱和硫酸铵液，边加边搅拌，使溶液最终为50%硫酸铵浓度。
（3）此溶液置冰中30min~60min，然后5000r/min离心10min，去上清。
（4）将沉淀溶于Tris－HCl缓冲液（40mMol/LNaCl）中（溶液可能混浊）。
（5）装入透析袋于Tris－HCl缓冲液（20mMol/LNaCl）中透析除盐。
（6）离心去沉淀。
单克隆抗体制备流程
（7）溶液稀释（1:100或更高倍稀释）后，于280nm测蛋白含量，估计蛋白质含量1A280unit=0.8mg蛋白质一般每ml腹水中，含有总蛋白约25mg~36mg。
（8）过DEAE—纤维素柱：纤维素柱高40cm，以20mMol/LNaClTris缓冲液平衡。透析样品以Tris缓冲液等量稀释。
样品进入柱床速度为1ml~2ml/min，以NaCl线形梯度洗脱。大部分单克隆IgG于40mMol/L和80mMol/LNaCl洗脱，也有极少例外的单克隆抗体于120mMol/L~150mMol/LNaCl洗脱。测OD280nm收集蛋白峰，单克隆IgG保存备用。
杂交瘤产生各种免疫球蛋白，但主要是IgG和IgM，究竟是哪种为主，则决定于抗原的免疫程序。免疫一次，且3天后就取脾，多为产生IgM的B淋巴细胞。免疫多次的多为IgG。