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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
22
- 英文名：
100mL
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海抚生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100mL
1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
核酸印迹膜染液100mL费用注意事项：
1. 组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
核酸印迹膜染液100mL费用实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
核酸印迹膜染液100mL费用详细介绍：
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文献和实验免疫金银染色（immuno gold silver staining，IGSS）
IGSS的主要 试剂 为银染液。以往一般用硝酸银染液，但其对光的稳定性较差；改用乙酸银溶液后稳定性加强，配方如下： A液：0.22％乙酸银溶液（乙酸银110mg溶于去离子水50ml中）。 B液：50％阿拉伯树胶溶液（阿拉伯树胶50g溶于去离子水100ml中，每天振摇3次，5天后过滤使用）。 C液：1％对苯二酚溶液（对苯二酚500mg溶于0.55mol/LpH3.8的柠檬酸盐缓冲液50ml中）。 D液：在C液中加入B液
mA。丽春红染色：转膜过程完成后，将膜从转膜夹中取出，立即投入丽春红染液中染色，大约染色 5 分钟后将膜由丽春红中取出，用清水轻轻冲洗膜，注意观察膜上的红色条带，当条带足够清晰后停止水洗，根据染色条带把膜适当剪小，留出目的蛋白所在的范围。然后用清水彻底冲洗膜，尽可能洗去残留的丽春红，使得条带消失。封闭：一般抗体采用 5% 脱脂奶粉+TBST 封闭；封闭时间为室温下一个小时，在摇床上进行。一抗杂交：在一个 1.5 ml 的 EP 管中加入 1 ml 的封闭液（5% 脱脂奶粉+TBST），再加
，拍摄 500nm 的样品颗粒物或制样“地形”三张； 命名：样品名-标尺-张数。 四、那么问题来了，我们是怎么制样的呢？1、制样用品：培养皿，滤纸，碳膜铜网，无尘纸；计时器， 镊子，10μL 移液枪及枪头等； 2、制样步骤：1）滤纸铺在培养皿内，用镊子将通网正面朝上小心放置在滤纸上；2）移液枪取 10μL 样液滴在铜网上，呈水滴状站立，计时 2min，使样本颗粒渗透，2min 后用针头将液滴挑开；3）取 10μL 染液以同样方式滴在铜网上，染色 1.5min，染色结束后用针头将液滴挑开
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