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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
41
- 英文名：
100uL
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海抚生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100uL
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
超螺旋 DNA 分子量标准100uL图片详细介绍：
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焦性没食子酸（标准品） 质量规格：BS Crystal violet
焦磷铜 质量规格：用于生化研究,进口 Crystal violet
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焦棓酚红 质量规格：AR OrangeⅡ
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超螺旋 DNA 分子量标准100uL图片操作流程：
1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
超螺旋 DNA 分子量标准100uL图片注意事项：
1. 组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
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文献和实验佚名 双螺旋DNA进一步扭曲盘绕则形成其三级结构，超螺旋是DNA三级结构的主要形式。自从1965年Vinograd等人发现多瘤病毒的环形DNA的超螺旋以来，现已知道绝大多数原核生物都是共价封闭环(covalently closed circle,CCC)分子，这种双螺旋环状分子再度螺旋化成为超螺旋结构(superhelix或supercoil)，如图15-11
E.coli 的 DNA 的总长度是其细胞长度的 100 倍，那么它的 DNA 怎样包装成类核（ mucleoid ）呢？原来其 DNA 存在着超螺旋。 1963 年 Jevome Vinogred 在离心分离多瘤病毒（ polyoma virus ）的环状 DNA 时，原以为在离心管中只会出现一条带，结果出现了两条带，他认为一条可能是松驰型 DNA ，另一条可能是超螺旋 DNA ，从而发现了 DNA 的超螺旋。双螺旋进一步卷曲就会形成三级结构——
沉淀超螺旋质粒 DNA 的浓度为 2.0 g/L，由 NaCl 对不同沉淀的溶解能力，确定溶解沉淀的最优盐浓度为 0.75 mol/L. 用此方法得到的超螺旋质粒 DNA 的纯度达 90% 以上，收率为 78.94%. RNA、蛋白质残量以及内毒素均符合药品质量标准要求. CTAB 对质粒 DNA 的沉淀效果与质粒 DNA 的初始浓度有关，并且超螺旋质粒 DNA 浓度的降低与 CTAB 的添加量呈一定的线性关系. 超螺旋质粒的分子量 越小越不易被分离，并且结构特性比分子量在分离过程中更据主导
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