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- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
30
- 英文名：
10mL
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海抚生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10mL
1. 组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL说明书详细介绍：
DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL说明书实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL说明书操作流程：
1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
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DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL说明书磷酸二钠二水 质量规格：0.98 L-Glutamic acid 5-methyl ester
磷酸二锰(>98%,BR) 质量规格：>99% N-Acetyl-L-leucine
磷酸二钾（标准品） 质量规格：0.98 L-Orn(Z)-OH
磷酸二钙一水(85%~95%,BR) 质量规格：>99%,BR N-Acetyl-L-phenylalanine
磷酸二铵（分析标准品,用于凯氏定法测定,≥99.5%） 质量规格：0.98 L-Prolinamide
磷酸二铵(SP) 质量规格：>98%,BR N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine
磷酸二铵(for HPLC,≥99.0%(T)) 质量规格：>98%,BR O-Benzyl-L-serine
磷酸伯安喹；磷酸伯氨喹 质量规格：纯度98%,BR O-tert-Butyl-L-serine
磷酸二钠二水(>98%,BR) 质量规格：>99%,选择性p110δ抑制剂 CAL-101 (GS-1101)
磷酸哌啉（标准品） 质量规格：98%,BR O-tert-Butyl-L-threonine
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文献和实验冷却至室温，保存于-20℃。 [实验步骤] (一)提取质粒 将3mL含Apm的LB液体培养基加入到两支试管中，分别接入含pQE-31质粒和pUC18-CAT的大肠杆菌，37℃振荡培养过夜。 以下的操作按试剂盒的说明书进行。(附试剂盒说明书) (二)质粒的琼脂糖凝胶电泳 将5mL洗脱液与3mL的DNA样品缓冲液混合，加于1.2% Agarose 做凝胶电泳分析。 附：试剂盒说明书 3S Spin Plasmid Miniprep Kit V 3．
提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。 二、制备重组DNA 1. 在灭菌的1.5mL 离心管中，加入pQE-31质粒10mL(2mg／mL)，2mL酶切缓冲液，1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液（各含10个单位），无菌双蒸水7mL，至反应混合物总体积为20mL，离心混匀，37℃反应过夜。 2. 在另一无菌1.5mL 离心管中，加pUC18-CAT 质粒20mL，加入3mL酶切反应液，lmL BamHI和HindIII酶的混合液，无菌双蒸水补到30mL，37℃
溶剂、二甲基亚石风、尿素、甲酰胺等 试剂 均可使DNA变性。温度升高引起的DNA变性叫热变性，过高pH引起的变性称为碱变性。DNA变性是可逆的，只要消除了变性条件，分开的两条互补链又可重新结合，恢复原来的双链结构，这一过程称为复性。加热后变性DNA在温度降低过程中的复性又称为退火。不同来源的DNA加热变性后，只要两条多 核苷酸 链的碱基有一定数量能彼此碱基互补配，就可以经退火而复性，形成由两条不同来源的DNA链组成的杂交双链。这种根据核酸分子变性及复性的性质，通过碱基
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