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- 2026年04月28日
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内质网，高尔基体，溶酶体，线粒体，内体，外泌体，细胞膜，细胞核，细胞核基质，想研究他们是怎么精细分工，又怎么互相配合，相互之间的关系又怎么样？平时矛盾多些还是暗送秋波多些？揭开这些神秘面纱，就能了解到他们在物质转运与利用、细胞器稳态调控等方面的作用，系统综合地解析复杂生命活动的调控机制，进而理解细胞器互作，蛋白转运在细胞、器官、个体水平的生理功能和在疾病发生中的作用。
但是！在过去几十年里，亚细胞结构提取一直是难题！传统方法需要超高速离心，操作冗长，得率低，交叉污染，降解严重。
在此，Invent又给大家带来了一波神操作，一整套的柱式法亚细胞结构分离工具，让你从此告别超高速离心和降解困扰，帮助大家加速研究进程！
核基质分离 Cat. No. NM-033
MinuteTMDetergent-Free Nuclear Matrix Protein Extraction Kit(for mammalian cultured cells/tissues)
无表面活性剂的核基质蛋白提取试剂盒使用离心管柱技术可将细胞蛋白分离成三个部分：胞质、核基质和不溶性组分（主要是核膜和核酸相关蛋白）。使用的缓冲液中不含表面活性剂和EDTA。整个操作可在一小时内完成，所提取的蛋白质处于天然状态，可用于许多下游应用，如凝胶阻滞、转录因子分析、细胞凋亡和蛋白质转运研究。
溶酶体分离 Cat. No. LY-034
Minute TM Lysosome Isolation Kit(for mammalian cells/tissues)
溶酶体是真核细胞中的球形囊泡，负责清除废物。溶酶体中的消化酶在消化多余或受损的细胞器、食物颗粒和吞噬的病毒、细菌中起着至关重要的作用。溶酶体是比较大的细胞器，大小从0.1到1.2μm不等。分离溶酶体是研究细胞自噬、蛋白质降解和蛋白质循环重要的第一步。传统的溶酶体分离方法是基于密度梯度超速离心法，需要大量的起始材料，操作方法冗长且耗时，交叉污染严重。目前，所有用于溶酶体分离的商业试剂盒都是基于上世纪70年代发展起来的方法。我们的试剂盒与市场上其他的溶酶体分离试剂盒不同，使用离心管柱技术，简单、快速、高效。所需的起始细胞/组织的量远小于传统方法。该试剂盒可以从培养细胞或组织中显著富集溶酶体，而不使用杜恩斯匀浆器和超高速离心，整个操作过程不到1.5小时。
肝脏高纯度内质网分离 Cat. No. ER-035
MinuteTMHigh Fidelity ER IsolationKit for Liver Tissue
内质网（ER）是一种重要的膜结构，在功能上连接核膜和质膜。肝脏中富含大量的内质网，是最常用于分离ER的原材料。传统分离ER的方法是基于密度梯度超速离心法。该方法需要大量的起始材料，方法冗长耗时，且交叉污染严重。目前，所有用于ER分离的商业试剂盒都是基于上世纪70年代发展起来的方法。与市场上其他ER分离试剂盒不同，本试剂盒采用了离心管柱技术，该技术简单、快速，只需要少量的组织，无需使用杜恩斯匀浆器和超速离心，即可分离冷冻肝组织的天然ER（主要是粗面内质网）。整个操作可以在大约2h内完成。
通用型内质网富集 Cat. No. ER-036
MinuteTM ER Enrichment Kit(For Tissues and Cultured Cells)
内质网是连接核膜和质膜功能的主要膜结构。内质网在真核细胞蛋白转运的胞外途径中起重要作用。在细胞质中合成的蛋白质被运送到内质网，囊泡将蛋白质运送到高尔基体，然后与质膜融合。传统分离内质网的方法是基于密度梯度超离心，需要大量的起始样品，方法繁琐，耗时，交叉污染严重。目前，所有内质网分离的商用试剂盒都是基于上世纪70年代开发的方法。与市场上的内质网分离试剂盒不同，我们的内质网分离试剂盒使用离心管柱技术，简单、快速，只需少量的起始培养细胞或组织，不需要使用杜恩斯匀浆器和超高速离心，就能从培养的细胞/组织中分离出天然ER(主要是粗面内质网)。整个操作可以在大约2h内完成。
高尔基体富集 Cat. No. GO-037
MinuteTMGolgi Apparatus Enrichment Kit
高尔基体(Golgi apparatus)又称高尔基复合体或高尔基器，由一系列扁平堆叠的囊(池)组成。高尔基体是真核细胞中重要的细胞器，负责蛋白质和脂质的运输、修饰及包装到囊泡中，以运送到目标位置。高尔基体在不同细胞和组织类型中的数量和分布变化很大。获取高质量的高尔基体是研究其功能及与其他细胞器相互作用的重要第一步。传统分离高尔基体的方法是基于密度梯度超离心，需要大量的起始材料，并且方法冗长且耗时。与其他高尔基体分离试剂盒不同，本试剂盒采用离心管柱技术，操作简单、快速，只需少量起始材料，不需使用杜恩斯匀浆器和超高速离心，高度富集天然高尔基体。整个操作过程可以在2h内完成。
质膜蛋白和细胞组分分离试剂盒 Cat. No. SM-005
Minute™ Plasma Membrane Protein Isolation and Cell Fractionation Kit
Minute TM 膜蛋白提取试剂盒通过离心管柱技术配合特定裂解液可以提取天然的膜蛋白。其原理是细胞/组织通过Buffer A致敏，然后细胞以Z字形路径通过离心管柱。在这个过程中细胞膜会破裂，分离出完整的细胞核，因此最终获得的膜蛋白中不含有核膜和核蛋白污染。通过差速离心和密度离心可以把细胞蛋白分为：总膜，细胞核，细胞质，细胞器及质膜，而无需超高速离心。不同于其他试剂盒，因为高速离心通过离心管柱时使细胞膜破裂，所以不需要匀浆，匀浆通常会引起膜蛋白提取结果的差异。而我们的试剂盒使用同样起始量的细胞，只需设定离心力和时间，结果一致性更好。整个操作过程不超过45分钟即可完成。本试剂盒可以快速从细胞或组织中分离天然的膜蛋白，可应用于SDS-PAGE, immunoblottings, ELISA, IP,膜蛋白结构分析, 2-D,酶活性检测等其他应用。
哺乳动物细胞/线粒体分离试剂盒 Cat. No. MP-007
Minute™ Mitochondria Isolation Kit for Mammalian Cells and Tissues
哺乳动物细胞/组织线粒体提取试剂盒由优化的缓冲液系统和2.0ml离心管柱组成。可以快速的从哺乳动物细胞/组织中提取线粒体蛋白。专利离心管柱技术使用方便简单，高产，与其他商业试剂盒相比，可以样品处理范围更广泛，可处理5-50million/样品，并且可以得到完整的线粒体。缓冲液系统不含表面活性剂和EDTA，无需匀浆和组织研磨，操作时间<30分钟。原理：细胞/组织通过Buffer A致敏，然后细胞以Z字形路径通过离心管柱，在这个过程中细胞膜会破裂。进而通过差速离心和密度离心分离出完整的线粒体，整个过程无需匀浆和超高速离心。提取出的线粒体可以应用于SDS-PAGE，immunoblottings,ELISA,IP,膜蛋白结构分析，2-D，酶活性检测和其他应用
Figure 1. Enrichment of Mitochondrial Marker (Ubiquinol-Cytochrome C Reductase Core Protein) with MinuteTM Mitochondria Isolation Kit.
A. SDS-PAGE profiles of total protein extract vs. isolated mitochondrial proteins. Lanes 1, 3 5, total proteins from isolated mouse kidney cells, mouse skeletal muscle and liver tissues respectively. Lanes 2, 4, 6, isolated mitochondrial proteins from mouse kidney cells, mouse skeletal muscle and liver tissues respectively.
B. Western blotting. Proteins in A were transferred to nitrocellulose membranes and probed with anti-ubiquinol-cytochrome C reductase core protein (ab96333, abcam, Cambridge, MA) and anti-lamin B1 (ab16048,a nuclear envelope marker protein. abcam, Cambridge, MA).
C. Densitometry measurement of mitochondrial marker signals.
肌肉组织及细胞线粒体提取试剂盒 Cat. No. MM-038
Minute™ Mitochondria Isolation Kit for Muscle Tissues/Cultured Muscle Cells
肌肉细胞内拥有大量的线粒体是因为肌肉细胞不断被用来驱动身体，另一种富含线粒体的器官是心脏，线粒体约占心脏细胞的40％。然而，从肌肉组织中分离线粒体并非易事，因为纤维间线粒体隐藏在肌肉纤维的深处。传统方法通常需要使用电动组织匀浆机，并使用超高速离心机，利用高密度介质（如Percoll梯度）进行纯化。本试剂盒利用了新一代离心管柱技术，可以从肌肉样品中快速，简单的分离线粒体，且易操作。从新鲜/冷冻肌肉组织中分离完整的线粒体仅需约1小时，产率高。
内体和细胞组分分离试剂盒 Cat. No. ED-028
Minute™ Endosome Isolation and Cell Fractionation Kit
初级内体（EE）是次级成熟内体的起点，初级内体主要是由内吞的囊泡相互融合形成。初级内体不仅仅通过网格蛋白介导的信号通路接受胞吞物，还有其他许多通路。胞吞机制除了在维持正常细胞生理中起到重要作用，还在阿尔兹海默病和遗传性溶酶体储积症等许多疾病中发挥了很大作用。传统分离内体的方法是采用密度梯度超速离心法，需要大量起始原材料，方法繁琐费时。Minute™内体分离试剂盒基于离心管柱法，快速简单，仅需要少量的培养细胞或者毫克级的组织样品。本试剂盒可以从培养的细胞和组织样品中大量沉淀富集初级内体，用于SDS-PAGE、immunoblottings、ELISA、IP、MS、2-D、酶活性检测等其他应用。
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文献和实验与试剂盒的工作状态，为进一步优化打基础。 预实验时需要认真阅读各类操作说明书，使用普通样品或少量样品进行条件摸索，记录结果和问题。优化方案时，每次只改变一个变量，对比优化结果和优化前的差别，修改实验设计至达到最佳实验效果。 到此 WB 方案设计完成，实验的整体思路已经非常明确了。做好 WB 整体设计是 WB 成功的开始！当然 WB 的成功还离不开严谨的实验操作和高质量的蛋白样品，只有选择适当的蛋白样品制备方式，才能锁定最终的成功。 Invent 离心管柱法系列蛋白快速提取和亚细胞结构分离工具，可提高
，从而提高目的蛋白检出率[4]。 （2）分离亚细胞结构富集目的蛋白 如果目的蛋白表达量较低或增溶后仍未检出条带，可根据目的蛋白定位进行亚细胞结构分离以富集目的蛋白，降低检测难度[5]。例如：当目标蛋白为跨膜蛋白时，其表达量低且难以提取，这种情况下可以先富集膜蛋白后再进行 WB 检测，有效降低检测难度且检测结果更清晰（如图 3）。使用柱式法亚细胞结构分离系列工具，无需超高速离心，无需自配溶液，无需研磨仪即可分离细胞膜、细胞核、内质网、高尔基体、溶酶体等亚细胞结构，大大降低了 WB 检测难度
：有谁知道哪里有比较好的电子显微镜方面的书？ little：你可以看看《细胞超微结构病理》凌冶萍主编 上海医科大学出版社；《实用生物医学电子显微镜技术》杨勇骥主编 第二军医大学出版社；这两本书对生物样品制样和电镜原理都有介绍。 slpg：《生物电子显微镜技术》张景强，朴英杰，等编著，中山大学出版社。比较实用。 fhsuperman：由于实验需要，打算买一台解剖显微镜，用来做小鼠ES细胞的分离。主要是要小巧，功能没必要很多，大家给推荐几个？ NewCureSeeker：仅从使用上来讲，请注意几个
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