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RT 避光
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大量
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100ml
产品简介:
中性红是一种弱碱性pH指示剂,变色范围在pH6.4~8.0之间(由红变黄)。分子式为C15H16N4·HCl,分子量为288.78。在中性或微碱性环境中,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌。由于液泡在一般情况下呈酸性反应,因此,进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色,在这种情况下,原生质和细胞壁一般不着色。死细胞由于原生质变性凝固,细胞液不能维持在液泡内,用中性红染色后,不产生液泡着色现象,相反,中性红的阳离子,却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合,而使原生质与细胞核染色。中性红乙醇染色液(0.1%)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液,常用于肥大细胞染色。
中性红乙醇染色液(0.1%)注意事项:
如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备70%和90%乙醇,无水乙醇以及。
首次使用本试剂时建议先取1~2个样品做预实验。
中性红染色液时,可以根据染色结果和要求调整时间。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验的时候出问题了 细胞估计已经破裂 固定时候应该缓慢添加固定液 有的时候固定液就是用PBS和无水乙醇配置的。 Fasta921 我做的步骤:接种适当浓度细胞于培养皿中,培养过夜后,经0.25%胰蛋白酶消化,冷磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后离心,用70%(体积分数)预冷乙醇悬浮细胞于-20度固定过夜后,离心收集细胞,用PBS洗3次去除乙醇,细胞团重悬于PBS中,用20 μg/ml含RNaseA的碘化丙啶PI染色液避光染色30 min,经100目尼龙
跑出分离胶时,停止电泳,约需45 min~1hr. 9 卸下胶板,剥离胶放入染色液中,室温染色1~2hr;加入脱色液,置于80rpm脱色摇床上,每20min更换一次脱色液(10ml冰乙酸;45ml乙醇;45ml蒸馏水)至完全脱净。
2.1 美蓝染色法 2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液 美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液 100mL 将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。 2.1.2 染色法 将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。 2.1.3 结果 菌体呈蓝色。
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