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- 详细信息
- 文献和实验
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RT
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大量
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
500ml
从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等。CTAB抽提法是经典的植物DNA提取法,可以用于多种不同类型植物样品DNA的提取,获得的量很高,但是纯度一般,但是足够用于大多数分子生物学实验。
自备材料:
1、 液氮或匀浆器
2、 恒温箱
3、 24:1
操作步骤(仅供参考):
1、 用液氮或干冰冷却匀浆器/粉碎器,将植物组织粉碎成细粉,将冷冻的组织转移到含有机溶剂的试管或烧杯中。
2、 取适量CTAB抽提液,按CTAB抽提液:2-ME=50:1的比例混匀,预热。
3、 向粉碎后的组织中加入预热的CTAB抽提液(4ml/g),充分混匀,65℃温育10~60min,并不时混匀。
4、 加入等体积24:1,颠倒充分混匀,4℃ 7500g离心5min,回收上层水相。
注意事项:
如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验1. 液氮研磨1g左右的植物组织,转移到离心管中。改用研磨枪在冰上研磨,不加β-巯基乙醇 研磨时可加入适量的PVP、β-巯基乙醇。若CTAB准备2-3天内用完,则可将PVP、β-巯基乙醇直接加入其中。 2. 加入500µl的2*CTAB (60℃或65℃预热) ,颠倒混合均匀后在60℃或65℃水浴30m-1h小时,其间要上下颠倒混匀数次。 3.取出离心管,加入
℃ Add 166 µl of 3M NaCl and mix thoroughly Add 80 µl of 10% CTAB in 0.7 M NaCl and thoroughly mix Incubate for 10 minutes at 65 ℃ In the hood in the back: Add an approximately equal volume of chloroform (700 µl) In the lab: Centrifuge
%26micro;l of 3M NaCl and mix thoroughly Add 80 %26micro;l of 10% CTAB in 0.7 M NaCl and thoroughly mix Incubate for 10 minutes at 65 ℃ In the hood in the back: Add an approximately equal volume of chloroform (700 %26micro;l)
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