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- gelatins
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- JC9753
- 2025年07月14日
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RT 避光
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大量
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
500ml
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色，是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏为碱性天然染料，可使细胞核着色。分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。Scott蓝化液全称为Scott TapWater/Bluing，又称Scott促蓝液，主要由硫酸镁、碳酸氢钠等组成，多用于苏木素染色后蓝化，尤其适用于Gill苏木素染色液(Gill No.3)的蓝化。
Scott蓝化液注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验一、预处理 1. 脱蜡至水 （1）二甲苯5分钟，2次 （2）100%酒精1分钟，2次 （3）95%酒精1分钟，1次 （4）85%酒精1分钟，1次 （5）双蒸水1分钟，3次 2. 加热预处理 （1）热预处理液（试剂盒内带）加热至98-100℃时，放入切片，15-20分钟。 （2）双蒸水洗1分钟，3次 3. 胃蛋白酶消化 （1）将胃蛋白酶先放入37℃温箱预热，然后滴加至组织上。 （2）室温，5-30分钟（其间用显微镜观察
情况而定) 3、每张切片加1滴3% H2O2，室温下孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS 冲洗3×3'。 4、除去PBS 液，每张切片加1滴相应的第一抗体(相应稀释倍数)，室温下孵育2小时。 5、PBS 冲洗3×5'。除去PBS液，每张切片加1滴聚合物增强剂(试剂A)，室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3'。 6、除去PBS液，每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物(试剂B)，室温下孵育30min。PBS冲洗3×5'。
以酸性12～15％的福尔马林最佳。大标本（2cm厚）一般需要6～12个小时，小标本一般需要3～6个小时；当室温低18℃时，可在37℃以下的温箱内加温4～6个小时。由于HE染色最佳着色PH为3.5～4.5, 中性福尔马林对苏木素染色有一定影响,细胞核容易发灰,核染色质不佳。 所以, 尽管中性福尔马林对抗原有很好的保存作用，但酸性福尔马林对绝大多数抗原来说也有很好的保存作用，所以在没有特别处理的情况下常规HE用12～15％酸性福尔马林也可以（每100毫升12～15％福尔马林液内加5毫升
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