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上海机纯实业有限公司
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1ml
DNA寡核苷酸退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos)简称为DNA退火缓冲液,是一种可用于DNA oligo退火的缓冲液,可用于常规的DNA oligo的退火,尤其适合于较难退火的用于RNAi (也称siRNA)质粒构建的DNA oligo的退火。由于RNAi质粒构建的DNA oligo通常由于含有约20个左右的互补序列,自身易形成发夹结构,从而影响两条DNA oligo的正确退火。
操作步骤(仅供参考):
1、 把待退火的DNA oligo用经灭菌的超纯水或Nuclease-Free Water配制成50μM,同时溶解Annealing Buffer for DNA Oligos(5×),混匀备用。
2、 按如下退火反应体系操作:
按照上述顺序,依次加入并混匀,如果所用PCR仪没有加热盖,可加入Mineral Oil防止液体挥发。
3、 按如下PCR仪的退火条件:
4、退火后可直接用于连接反应,也可以-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应,用纯化试剂盒进行纯化,或者确保退火产物在反应体系中体积不超过5%,以避免Annealing Buffer对后续的酶反应体系的干扰。
注意事项:
避免反复冻融,以免效率下降。
该试剂只适合于DNA oligo的退火,不适用于RNA oligo 的退火。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验某基因的序列如下,我设计了一对引物,5 TCGGTTTTCACTGGTTCTCATCC 3 3 T CGCACTCCTTTCTCTCGCAATG 5 想扩增的目的片断是3629-4799 (1170 bp,)不知道能否,请大侠们帮忙看一下, 3601 ttttttaatt tcaggatatg gagcttcttc ggttttcact ggttctcatc cagtcctggc 3661 tgaccccagt gcaataccta agcaaggtgt ttacaaacaa
骡(Equus asinus×Equus caballus orientalis)
脊椎动物,哺乳纲,奇蹄目,马科。一般指公驴和母马杂交后所生的种间杂种。体型较大,像马,叫声似驴,耳长,鬃毛和尾毛则介于马和驴之间,俗称“马骡”。蹄小、四肢筋腱强韧。不仅耐粗饲料、耐劳,抗病力及适应性强,而且挽力大并能持久。故适于拉车和驮物,骡极少有能繁殖后代的;如是公马和母驴杂交后所生的种间杂种,称为駃騠,体形似驴,故俗称“驴骡”。
一般先配制50倍的TAE缓冲液,用时再稀释成1倍的。 50倍TAE缓冲液的配制方法为 1. 称取下列试剂于1L烧杯中: Tris 242g Na2 EDTA.2H2 O 37.2g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解
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