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- 技术资料
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RT
- 库存:
大量
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100ml
TNE缓冲液(10×,pH7.4)主要由Tris、EDTA、NaCl组成,所以简称为NTE缓冲液。该试剂主要用于吸收和荧光光谱学定量RNA和DNA,只要考虑了污染物和缓冲液组分的作用,吸收测量时很直接简单的方法,荧光分析比A260更不易受干扰。
自备材料:
1、 分光光度计
2、 石英杯
3、 牛胸腺DNA标准溶液
操作步骤(仅供参考):
用去离子水稀释TNE缓冲液(10×,pH7.4)至1×。
取1ml 1×TNE缓冲液吸入石英杯,放入单光束或双光束分光光度计中,在352nm处读值,仪器调零。该空白溶液作为双光束仪器的参照。对于单光束分光光度计,去除空白杯,插入含有DNA样品或标准品的石英杯,读数。在280nm(蛋白)、260nm(核酸)、230nm(肽、酚、尿素)重复该过程。
用A260读数代入如下方程计算核酸的浓度(C):
单链DNA: C(pmol/μl)= A260/(10×S) C(μg/ml)= A260/0.027
双链DNA: C(pmol/μl)= A260/(13.2×S) C(μg/ml)= A260/0.020
单链RNA: C(μg/ml)= A260/0.025
寡核苷酸: C(pmol/μl)= 100×A260/(1.5NA+0.71NC+1.2NG+0.84NT)
其中,S代表DNA大小(单位是kb),N代表碱基数。
用A260/A280比值和A230和A325处的读值来估计核酸样品的纯度,比值在1.8~1.9显示DNA纯度高,比值在1.9~2.0显示RNA纯度高。
注意事项:
如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
自备材料:
1、 分光光度计
2、 石英杯
3、 牛胸腺DNA标准溶液
操作步骤(仅供参考):
用去离子水稀释TNE缓冲液(10×,pH7.4)至1×。
取1ml 1×TNE缓冲液吸入石英杯,放入单光束或双光束分光光度计中,在352nm处读值,仪器调零。该空白溶液作为双光束仪器的参照。对于单光束分光光度计,去除空白杯,插入含有DNA样品或标准品的石英杯,读数。在280nm(蛋白)、260nm(核酸)、230nm(肽、酚、尿素)重复该过程。
用A260读数代入如下方程计算核酸的浓度(C):
单链DNA: C(pmol/μl)= A260/(10×S) C(μg/ml)= A260/0.027
双链DNA: C(pmol/μl)= A260/(13.2×S) C(μg/ml)= A260/0.020
单链RNA: C(μg/ml)= A260/0.025
寡核苷酸: C(pmol/μl)= 100×A260/(1.5NA+0.71NC+1.2NG+0.84NT)
其中,S代表DNA大小(单位是kb),N代表碱基数。
用A260/A280比值和A230和A325处的读值来估计核酸样品的纯度,比值在1.8~1.9显示DNA纯度高,比值在1.9~2.0显示RNA纯度高。
注意事项:
如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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TNE缓冲液(10×,pH7.4)
¥160









