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公司简介:
Active Motif公司是一家致力于研发和生产核细胞分子生物学和表观遗传学研究用试剂的专业公司,也是世界著名的转录因子试剂生产商和ChIP-Seq外包服务供应商。
Active Motif的产品涉及:表观遗传学相关抗体、ChIP级别抗体、重组识别子和催化酶、预甲基化修饰的重组组蛋白、多聚核小体和生物素标记核小体;以及各类染色质分析、转录因子表达调控分析和DNA甲基化分析的试剂盒等。
AbFlex® 重组抗体
AbFlex® 抗体是利用精确的DNA序列生产的特异性高,重复性好的重组抗体(rAbs),除了可以灵活选择抗体标记物和纯化方式以外,每个AbFlex®抗体都含有转肽酶识别序列(LPXTG),利用我们的Sortag-IT Labeling Kits能够以一种直接的可重复的方式将荧光基团、酶(HRP,AP…等等)、多肽、DNA、药物或者其它标记物共价结合到抗体上。AbFlex®上还带有6xHis标签,可用于以镍为基础的纯化体系,另外还带有亲和素标签序列,可在生物素连接酶如BirA的作用下与生物素结合。AbFlex®重组抗体优势
·可灵活选择标记物和纯化方式;
·性能稳定,无批次间差别;
·抗体具有高度特异性和灵敏度;
·可信赖的长期供货;
·生产过程不含动物成分(Animal-free);
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文献和实验、双甲基化或三甲基化有关。组蛋白修饰最基本的作用是调控基因表达。例如组蛋白甲基化多导致基因沉默,去甲基化则相反;乙酰化一般是转录激活,去乙酰化则相反。当然,也可在此基础上产生复杂的生物学效应。例如组蛋白去乙酰化酶 HDAC 可影响免疫系统;H3K4me3、H3K9me2 能够调控记忆的形成, 而且 H3K 甲基化与 X 染色体失活、基因组印记和异染色质形成有关;H3 乙酰化通过多种机制调控以来 ATP 的染色质重塑 [12],并参与炎症反应;H2A、H2B 泛素化则与 DNA 损害反应有关;而 H3
Active Motif ChIP 实验专家技术经验分享:如何判断 ChIP 成功与否?
对照转录因子)或 H3K4me3 的 ChIP(用于对照组蛋白修饰)。即使确定抗体可以用于做 ChIP,但对于目的细胞样本,如果之前没有做过,而且不确定目的蛋白结合的区域,一般也可以用别人报道过的对照细胞株作为对照,与目的细胞样本同时做 ChIP,确定 ChIP 是否成功。第二,整个实验是否真的 work?也就是如何排除假阳性?这就需要做阴性对照。阴性对照包括阴性对照抗体 IgG 和阴性对照区域(即阴性对照引物)。阴性对照 IgG 用于排除目的蛋白结合的 DNA 区域是抗体非特异性结合的,区域对照
validation),也是抗体业仅有的 1,000 多个通过「敲除验证」的高品质商业抗体!第二种情况,相对复杂,需要引用别人已发表的敲除验证的数据。请注意,并不是引用的文献越多越好,而是要有至少一篇证明抗体特异性的文献。以下以发表在 Cell Report 上 CFP1 靶点研究文章4 为例。这篇文章研究的是不孕症里的一种卵母细胞不能完成发育的情况,涉及到基因信息的传递和表观遗传学的机制。其中组蛋白修饰 Histone modifications 是卵母细胞在发育中的关键步骤,该研究应用了卵母细胞的 CFP
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