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- 2025年07月12日
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1年
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-20°C
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华因康
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大量
- 规格：
5000U-10000U
Phi29 DNA聚合酶具有高效的DNA合成能力，同时具有3'→5'外切酶校读功能，还具有特殊的链置换和连续合成特性。
应用
1.恒温protein-primed DNA扩增。
2.利用随机引物扩增DNA。
3.滚环复制。
4.复制extended-region。
来源
从Bacillus subtilis噬菌体Phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶，利用基因重组技术，使用大肠杆菌表达和纯化Phi29 DNA聚合酶。
活性单位定义
在30°C条件下，10min内能使0.5 pmol 的dNTP掺入酸不溶性物所需要的酶量定义为1个活性单位。
贮存条件
-20℃贮存。
热失活
650℃ 10min。
质量控制
考马斯蓝染色SDS-PAGE检测纯度大于90％，并无内切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。
应用
滚环复制方法：
第一步：样品（菌液或质粒）准备：
2.质粒准备：扩增已纯化的环状质粒，稀释至1μg/ml。
| 样 品 | 1μl |
| 10×反应缓冲液 | 5μl |
| 100μM随机引物 | 1μl |
| ddH2O | 预留第四步需要加入组分的体积，最终反应体积50μl |
第四步：加入dNTP 1-2μl、100×BSA 0.5μl、Phi29 DNA Polymerase 0.2-1μl。
第五步：扩增反应：30℃，反应12-16h。
第六步：失活反应：65℃，反应10min。
第七步：检测扩增效果：选用酶切位点唯一的内切酶进行酶解反应，再用琼脂糖凝胶电泳检测扩增效果。
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文献和实验otherwise. Multiply primed rolling circle amplification (MPRCA) and multiple displacement amplification (MDA) methods are based on the same principle. The DNA amplification is non-PCR based and uses Φ29 DNA polymerase and random hexamer primers for unbiased
We report a simple homogeneous fluorescence assay for quantification of DNA polymerase function in high throughput. The fluorescence signal is generated by the DNA polymerase triggering opening of a molecular beacon extension of the template
PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应，对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么，对于 PCR 反应的核心成份，DNA 聚合酶，你选对了吗？ 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等，常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分，高保真聚合
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