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41
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上海禾午生物科技有限公司
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18305-60-7
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0.97
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文献和实验延胡索酸 fumaric acid 为乙烯的反式二羧酸 [反丁稀二酸 ]。它的顺式为马来酸(顺丁烯二酸)。它除以钾盐的形态广泛存在于植物 界(例如 Fumaria officinalis)外,还可通过微生物发酵生成(延胡索酸发酵)。在好氧代谢中,它作为三羧酸循环的一环起重要作用,琥珀酸如为琥珀酸脱氨酶所氧化,便生成延胡索酸。后者在延胡索酸的作用下,加一分子 H2O,就形成苹果酸。这些酶促反应是可逆的,在大多数细胞和组织的呼吸途径中,占有重要的位置。
DNA量为0.5~3ug,如标记大量DNA需相应增加反应物和反应体积。若延长37℃孵育时间(到20h)可增加DIG标记产物量。 (二)斑点杂交法 【材料】 1.硝酸纤维素膜,待检标本DNA 2.标准预杂交液(5× SSC;0.1%月桂酸;0.02%SDS;1/10体积的10倍浓缩阻断液(含变性并剪切的鲑精DNA)。 3.洗液1(2×SSC,0.1%SDS); 洗液2 (0.1×SSC,0.1 %SDS)。 【方法】 1.杂交膜的制备 ①
后置-20℃保存 20×SSC 10×PBS (DEPC处理的)含50%甲酰胺的杂交液(HS)--- 1ml分装后置-20℃保存 10×阻断液(10×BS) Buffer I Buffer II Buffer III 探针(P) 抗Dig-Ap NBT/BCIP 二、操作流程: 1) 脱蜡至水: 二甲苯5min×2 → 90%乙醇5min → DEPC水洗涤5min×2 2) 杂交前处理: 1×PBS洗涤5min → 蛋白酶K(终浓度20ug/ml in PBS)37℃
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