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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pCMV-SPORT6-CDC23(11-1794bp)质粒
- 库存:
41
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验的克隆方法将目的基因克隆进入门载体。 (2)混合包含目的基因的入门克隆和合适的目的载体以及Gateway LR Clonase酶,构建表达克隆。(表达克隆用来在合适的宿主中进行蛋白的表达和分析。) 有几种方法可以构建Gateway入门克隆。无论您选择何种方法,创建的入门克隆都是准备用来与各种目的载体进行重组。 (1)PCR克隆(定向TOPO克隆至入门载体或与供载体B×P重组) (2)限制性内切酶消化和连接进入入门载体 (3)使用pCMV•SPORT6或pEXP-AD502*构建
CRISPR-Cas9 全程实操教程:从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
冻存。10. 获得单克隆细胞株当肉眼可见类似于菌落的细胞团时,将其从大盘或 96 孔板消化下来转移至 12 或 24 孔板中继续扩大培养。注意不要污染到其它细胞团,不要选取过密的细胞团。11. 扩大培养,提取细胞全基因组 DNA 和细胞总蛋白12. 测序Guide 序列上游 100bp 左右和下游 200bp 左右为上下游设计一对引物,以全基因组为模板,以上述引物进行 PCR。PCR 产物送测序,或将产物用 T7E1 进行酶切消化检测突变。13. Western与阴性对照相比,靶基因应完全敲除
醛酸酶,使果实开始软化。运输过程中,造成伤害,降低了商品品质。 b)多聚半乳糖醛酸酶基因 在1980s中期,ICI种子公司的生物技术部与Nottinghan大学合作进行了实验。从正常多聚半乳糖醛酸酶基因的5’端获得了一个730bp的限制性片断,包含了一半的编码序列,将植物的多腺苷酸化信号连接到片段的头部,CaMV启动子连接到尾部,插入Ti质粒pBIN19中。引入植物后,转录后形成了反义RNA 。降低了多聚半乳糖醛酸酶基因的表达。 图11-29 延迟成熟番茄的构建过程三 病毒介导的遗传
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