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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
26
- 英文名：
大豆根瘤菌
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
冻干粉
大豆根瘤菌说明书培养及打管说明
1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。
3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
大豆根瘤菌说明书菌种的培养：
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在上延续使用半年左右。
6、如果有些菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。
李氏菌增菌肉汤(LB)基础250g添加奈啶酮酸，黄素，即为LB，用于李氏菌二步增菌(GB标准)
营养盐琼脂 Nutrient Salt agar 用于纺织中检验材料耐真菌、霉菌的效能
AB琼脂 Alealine Bile Salt Agar 250克 分离霍乱弧菌
溶菌酶多粘菌素琼脂基础LPA250g/瓶用于炭疽杆菌分离培养,每培养基中添加2支222支2incubationmedia溶菌酶多粘菌素琼脂基础LPA250g/瓶用于炭疽杆菌分离培养,每培养基中添加2支222支21209
SucroseTrypt
四磺酸盐煌绿增菌液基础（TTB）颗粒 250g 用于沙门氏菌选择性增菌培养
Baird-Parker琼脂基础颗粒 250g 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养（GB、SN标准）
7.5%肉汤颗粒 250g 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养（GB标准）
孟加拉红培养基颗粒 250g 用于食品中霉菌及酵母菌总数测定
Bolton肉汤250g用于空肠弯曲菌的增菌(GB标准)
弧菌显色培养基 Vibrio Chromogenic Medium 用于弧菌的显色培养，副溶血性弧菌显蓝色，霍乱弧菌显红色，其它弧菌显红色或无色
Half –Fraser 添加剂 Half-Fraser Supplement 5ml*2 添加到HB4190中，用于李氏菌的选择性增菌培养
3%録胰蛋白胨大豆琼脂250g/瓶用于副溶血性弧菌纯化incubationmedia3%録胰蛋白胨大豆琼脂250g/瓶用于副溶血性弧菌纯化
LactoseBileFermentBroth
出芽短梗霉
罗斯酵母
惰性解油螺旋菌
沙保罗琼脂平板70mm
烟曲霉
师岗链霉菌
Hyphomonasjohnsonii 模式菌株
Methylophagamurata 模式菌株
伴放线放线杆菌 血清B型
类干酪乳杆菌类干酪亚种 模式菌株
大豆根瘤菌说明书玫瑰红琼脂培养基90mm
长野解普鲁兰杆菌
扣囊内孢霉
粗毛斗菇
克鲁斯假丝酵母
烟酸芽孢杆菌
大豆根瘤菌说明书传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法：
① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。
大豆根瘤菌说明书常用的冷冻保存法：
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围最广的微生物保存法。
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文献和实验一类好气的无芽孢杆菌或多型性细菌，染色呈革兰氏阴性反应。在土壤中分布很广。是同豆科植物共生，在其根部形成根瘤的一类固氮菌。细菌在根瘤中形成类菌体，并有固氮能力。植物供给根瘤菌矿质养料和能源，根瘤菌固定大气中的游离氮，为植物提供氮素养料。一种豆科植物只能同一个或少数几个相应的根瘤菌品系共生。如豌豆根瘤内分出的根瘤菌只能在豌豆、蚕豆等植物根部形成根瘤；大豆只能由大豆根瘤中分出根瘤菌形成根瘤等。用根瘤菌剂拌种，能使幼苗形成更多的根瘤，提高作物产量。
2011年中国农业大学的科学家把丛枝菌根真菌（GM）和慢生大豆根瘤菌（BJ）注射到大豆苗中，通过原位的非损伤微测技术研究了两种真菌单独的作用和相互作用对根瘤或者根外菌丝的H+外流。GM把真菌菌根侧根根瘤的H+外流提高了3倍，BJ把侧根接近根瘤部位菌丝的H+外流提高了8倍。植物P含量的增加与根瘤和菌丝的H+外流呈显著的线性正相关。研究结果认为侧根AM真菌诱导了固氮酶的活性，增加了根瘤的H+外流。 这项研究使我们认识到真菌菌根和根瘤菌相互作用增加了根瘤空间和菌丝空间
于 1982年从根瘤菌属中分化出来的，属内暂有一种，即曾经称为大豆根瘤菌的大豆慢生根瘤菌。上述两属细菌时常制成细菌制剂在田间施用，作为作物或牧草增产的一种手段（见固氮微生物）。 土壤杆菌属 1942年由 H． J．康恩建立。其性状与前述两属的根瘤细菌颇相似，但不能在豆科植物根上形成能共生固氮的根瘤。本属细菌能够通过外伤入侵多种双子叶植物和裸子植物，致使植物细胞转化为异常增生的肿瘤细胞，产生根癌、毛根和杆瘿等病状。土镶杆菌属内各个种诱发根癌的能力与其所特有的 Ti质粒有关。本属细菌为土传
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