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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
56
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20℃或-80℃
- 规格：
10mL
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:5:24:1)抽提两次(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
His 标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mL品牌介绍：
His 标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mL品牌存新鲜组织样品：
1. 估计完全浸没样品所需要 RNALOCKER 的体积（1g 组织需 10 mL） RNA。
2. 标记收集管并加入估计所需量的 RNALOCKER。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
His 标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mL品牌服务流程：
1）客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
非冻型组织 RNA 保存液250mL图片客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作
以下是His 标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mL品牌的相关产品正在热销:
CD229/SLAMF3 CD229抗体规格: 0.2ml
RASSF1A Ras相关区域家族1A抗体规格: 0.1ml
Calcineurin A/PP-2B alpha 1 钙调磷酸酶抗体规格: 0.1ml
Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的小鼠抗大鼠IgG规格: 0.1ml
KLK10 激肽释放酶10抗体规格: 0.1mlPKA/PKAcat/PKACB 蛋白激酶A抗体规格: 0.1ml
SCP3 联会复合体蛋白3抗体规格: 0.1mlRabbit Anti-Mink IgG/APC APC标记的兔抗水貂IgG规格: 0.1ml
GZMA/Granzyme A 颗粒酶A抗体规格: 0.2ml
CLEC2D/OCIL CLEC2D蛋白抗体规格: 0.2ml
CEACAM16/CEAL2 胚抗原相关细胞粘附分子16抗体规格: 0.2mlBTF/BCLAF1 Bcl2相关转录因子抗体规格: 0.2ml
TSARG7 子形成相关凋亡蛋白7抗体规格: 0.2mlCNTNAP4 接触蛋白相关蛋白4抗体规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 胶体金标记的兔抗牛IgM规格: 2ml
His 标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mL品牌Caki-1, 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞
小鼠前列腺上皮细胞完全培养基 100mL
杂交瘤（B类）；Z51B3C10H12A12G2F7B5
人角膜内皮细胞完全培养基 100mL
正常大鼠肾细胞；NRK
小鼠原B细胞株；BaF3
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM932
人脑瘤细胞；SF17
亚利桑那菌琼脂（SA） 100g 用于亚利桑那菌选择性分离培养。（SN 0170-92）
MA, 小鼠星形胶质细胞
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文献和实验mM Tris-HCl,2mM ATP,10mM MgSO4,pH7.4中37°C温浴10分钟而破坏.或者把有标签 蛋白通过ATP-agarose或相似的纯化介质或进行离子交换层 析来除去. 标签蛋白被蛋白酶部分降解 加入蛋白酶抑制剂.多条条带可能是由于目的蛋白被蛋白 酶部分降解的结果.在裂解溶液中加入1mM PMSF可能会 使结果变好.一种无毒的水溶性的PMSF替代物是AEBSF, Roche Biochemicals的商品名为Pefabloc SC.注:丝氨酸 蛋白酶抑制剂必须在使用凝血酶或凝血因子Xa
较多，什么原因? 如何优化? 高纯度的蛋白是纯化工作者的追求，但是由于很多天然的蛋白也会带有HIS，所以经常会出现HIS 标签蛋白洗脱后有一些杂带，可能的原因和优化的方法如下： 可能原因：蛋白酶部分降解了标签蛋白 策略：请添加蛋白酶抑制剂。 可能原因：杂质对镍离子有更高的亲和性 策略1：咪唑浓度必须优化，以确保高纯度( 宿主细胞蛋白质的低结合) 和高产率( 组氨酸标记的目标蛋白质的强结合) 之间的最佳平衡。分步或者线性洗脱摸索出最优的咪唑
HCI调pH 值至8.7，定容至100ml 。( 6)浓缩胶缓冲液（0.5mol/L Tris-Hcl，pH6.8）Tris 6.06g ，适量水溶解，然后用1mol/L HCI 调pH值至6.8，定容至l00ml。( 7 ) 10%SDS SDS1g，加水10ml溶解。( 8 ) 10%过硫酸铵 1g过硫酸铵，加水10ml溶解，现用现配，冰箱中最多可贮存一周。( 9 ) TEMED（四甲基乙二胺）4℃，棕色瓶中贮存。( 10)样品缓冲液（pH8.0）Tris 6.05g，甘油50ml，巯基乙醇25
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