含225ml FB1增菌液均质袋

手把手教你做好体外 DNA 重组

菌种接种于 500 mL LB 培养液 (含用于筛选的抗生素) 中，37 ℃ 以 225 rpm 速度振荡培养 12～16 小时；2. 10,000 rpm，4 ℃ 离心 15 min 收集菌体；3. 将细菌悬浮于 100 mL 预冷的 STE（0.1M NaCl，10 mM Tris.Cl，pH8.0，1 mM EDTA，pH8.0）中，12,000rpm 离心收集菌体；4. 将菌体悬于 10 mL 细菌悬浮液中，再移至 50 mL 离心管中；5. 加入 1 mL 用 10 mM Tris.Cl (pH

流式细胞术实验流程

刺激的细胞，直接将刺激后的细胞悬浮在细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)中，然后进行第2步。 1.2 加满细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS), 300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。 红细胞裂解 2.1 如需裂解红细胞（如脾脏），将10x红细胞裂解液(ACK buffer)用去离子水稀释到1x，放置到室温。将细胞重悬于3mL的1x ACK buffer中，室温孵育2-3分钟；如不需要裂解红细胞，直接进入第3步,。 2.2 加入10mL细胞染色buffer(或含1%BSA

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

科镊子提起腹膜，用 5mL 注射器往小鼠腹腔注射 2.5mL 预冷 PBS（勿扎到脏器），轻揉小鼠腹部1~2 min。注射器回抽腹腔灌洗液，收集于15mL 离心管中。 重复第 5 步 5 次，冲洗腹腔，可观察到冲洗液逐渐澄清。 将收集的腹腔灌洗液 300 g 离心 5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液或者含 10% 胎牛血清的 1640 培养液重悬细胞。 进行细胞计数，并调整细胞浓度至 1×107/mL。 注意事项： 若第 7 步离心弃上清后发现细胞沉淀中有较多红细胞，且检测目的细胞非红细胞，先