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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名:
PEST含核蛋白抗体说明书
- 抗体英文名:
Anti-PCNP
- 靶点:
详见说明书
- 浓度:
1mg/1ml
- 应用范围:
产品应用WB=1:100-500ELISA=1:500-1000IP=1:20-100IHC-P=1:100-500IHC-F=1:100-500IF=1:100-500
- 宿主:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 库存:
45
- 级别:
详见说明书
- 目录编号:
详见说明书
- 抗原来源:
Rabbit
- 保质期:
详见说明书
- 适应物种:
详见说明书
- 标记物:
详见说明书
- 克隆性:
多克隆
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 形态:
详见说明书
- 亚型:
IgG
- 免疫原:
KLHconjugatedsyntheticpeptidederivedfromhumanPCNP
- 规格:
0.2ml/200μg
中文名称 PEST含核蛋白抗体说明书
别 名 PCNP;PCNP_HUMAN;PESTcontainingnuclearprotein;PESTproteolyticsignalcontainingnuclearprotein;PESTproteolyticsignal-containingnuclearprotein;PEST-containingnuclearprotein.
浓度1mg/1ml
规格0.2ml/200μg
抗体来源Rabbit
克隆类型polyclonal
交叉反应Human,Mouse,Rat,Dog,Cow,Horse,Rabbit,Sheep
产品类型一抗
研究领域细胞生物染色质和核信号细胞周期蛋白
蛋白分子量predictedmolecularweight:
19kDa
性状LyophilizedorLiquid
免疫原KLHconjugatedsyntheticpeptidederivedfromhumanPCNP
亚型IgG
纯化方法affinitypurifiedbyProteinA
储存液Preservative:15mMSodiumAzide,Constituents:1%BSA,0.01MPBS,pH7.4
产品应用WB=1:100-500ELISA=1:500-1000IP=1:20-100IHC-P=1:100-500IHC-F=1:100-500IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
notyettestedinotherapplications.
optimaldilutions/concentrationsshouldbedeterminedbytheenduser.
保存条件Storeat-20°Cforoneyear.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Thelyophilizedantibodyisstableatroomtemperatureforatleastonemonthandforgreaterthanayearwhenkeptat-20°C.WhenreconstitutedinsterilepH7.40.01MPBSordiluentofantibodytheantibodyisstableforatleasttwoweeksat2-4°C.
ImportantNoteThisproductassuppliedisintendedforresearchuseonly,notforuseinhuman,therapeuticordiagnosticapplications.
产品介绍
Function:
Maybeinvolvedincellcycleregulation.
Subunit:
InteractswithUHRF2/NIRF.
Post-translationalmodifications:
Ubiquitinated;mediatedbyUHRF2andleadingtoitssubsequentproteasomaldegradation.
PEST含核蛋白抗体说明书技术外包服务:
★分子生物学:质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物学:基因合成、引物合成、基因测序、载体构建等
★蛋白工程:原核、哺乳动物蛋白表达系统等
★病毒包装:腺病毒、慢病毒等
★抗体工程:磁珠分选、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等
★细胞工程:细胞表型分析(凋亡、增殖、周期、迁移、侵袭、修复、克隆形成)、细胞培养、细胞膜制备、稳定细胞株构建、细胞RNAi技术等等。
PEST含核蛋白抗体说明书抗体的生物素化标记实验要点:
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L缓冲液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件;
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等;
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性;
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及基,也可与糖基共价结合;
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
ELISAKitforHumanCytochromeP4503A515.6-1000pg/mL
人酪氨酸蛋白激酶CSK(Tyrosine-proteinkinaseCSK)ELISA试剂盒0.156-10ng/mL
ELISAKitforHumanTyrosine-proteinkinaseCSK0.156-10ng/mL
人封闭蛋白2(Claudin-2)ELISA试剂盒15.6-1000pg/mL
ELISAKitforHumanClaudin-215.6-1000pg/mL
人水闸蛋白3(CLDN3)ELISA试剂盒15.6-1000pg/mL
ELISAKitforHumanClaudin-315.6-1000pg/mL
人硫代羧化物脱氢酶(CRYM)ELISA试剂盒15.6-1000pg/mL
ELISAKitforHumanThiomorpholine-carboxylatedehydrogenase15.6-1000pg/mL
人补体C4-B(ComplementC4-B)ELISA试剂盒15.6-1000pg/mL
ELISAKitforHumanComplementC4-B15.6-1000pg/mL
人细胞粘附分子3(Celladhesionmolecule3)ELISA试剂盒0.312-20ng/mL
ELISAKitforHumanCelladhesionmolecule30.312-20ng/mL
人线粒体25-羧基维生素D-1α羟化酶(CYP27B1)ELISA试剂盒15.6-1000pg/mL
ELISAKitforHuman25-hydroxyvitaminD-1alphahydroxylase,mitochondrial15.6-1000pg/mL
人线粒体细胞色素c氧化酶亚基5a(Cytochromecoxidasesubunit5A,mitochondrial)ELISA试剂盒0.312-20ng/mL
ELISAKitforHumanCytochromecoxidasesubunit5A,mitochondrial0.312-20ng/mL
人细胞色素B5(Cytochromeb5)ELISA试剂盒15.6-1000pg/mL
ELISAKitforHumanCytochromeb515.6-1000pg/mL
人细胞色素P4501A1(CytochromeP4501A1)ELISA试剂盒1.56-100ng/mL
PEST含核蛋白抗体说明书
PEST含核蛋白抗体说明书抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)抗体亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
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文献和实验γRⅢ/Ⅱ 结合,封闭非特异性染色,使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入 0.5-1 μg 纯的抗小鼠 CD16/32 单克隆抗体,室温孵育 10 分钟。 对于人和大鼠,可直接使用过量的,与荧光抗体相同来源和亚型的纯化 Ig 或者与目标种属相同来源的血清进行阻断,或者用商业化的 Fc 受体阻断剂。 五、细胞染色 按照说明书的推荐用量加入荧光标记抗体,混匀后置于 4℃,避光孵育 30 分钟。 加入细胞染色 buffer (或含 1%BSA 的 PBS)重悬细胞,300g 离心
收集目标蛋白以下信息: 1. 目标蛋白的名字 2. 目标蛋白在哪些组织中表达,是否具有特异性 3. 目标蛋白的分子量 4. 目标蛋白在细胞中的表达位置及表达量 5. 是否有相应的抗体 如何获取这些信息呢?除查询文献外我们可以借助生物信息学方法及一些产品信息获取相关信息。例如使用 Uniport,维基百科,NCBI,ExPASy 等进行查询。还可以通过相应抗体产品提供的信息进行查询。 了解了目标蛋白以上内容后,我们就可以开始做 WB 设计啦! 二、WB 方案
性染色,使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入0.5-1μg纯的抗小鼠CD16/32单克隆抗体,室温孵育10分钟。 对于人和大鼠,可直接使用过量的与荧光抗体相同来源和亚型的纯化Ig或者相同来源血清进行阻断,或者用商业化的Fc受体阻断剂。 细胞染色 4.1 按照说明书的推荐用量加入荧光标记的抗体,混匀后置于4℃,避光孵育30分钟。 4.2 加入适量细胞染色buffer (或含1%BSA的PBS)重悬细胞,300g离心细胞悬液5分钟,弃掉上清。 4.3 加入0.2 mL
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