Peroxidase 来源于辣根

属性

类型

Type VI

质量水平

300

形式

essentially salt-free, lyophilized powder

比活

≥250 units/mg solid (using pyrogallol)

分子量

~44 kDa

溶解性

0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)

吸光度比值

RZ 2.5-4.0

应用

diagnostic assay manufacturing

储存温度

2-8°C

InChI

1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H

一般描述

辣根过氧化物酶是从辣根（Amoracia rusticana）中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量（约44 kDa）包括多肽链（33,890道尔顿）、氯化血红素加Ca²⁺ （约700道尔顿）和碳水化合物（约9,400道尔顿）。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。

应用

该酶已用于开发基于热稳定性大豆过氧化物酶的生物传感器，通过氧化还原传导水凝胶将酶交联并“电连接”到玻璃碳电极上。它还用于测定低密度脂蛋白的氧化。

辣根过氧化物酶（HRP）分离自辣根（紫穗槐），属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。 它被用作western blot、ELISA和免疫组化等生化应用。 辣根过氧化物酶用于扩增弱信号并提高靶标分子如蛋白的可检测性。 产品P8375，VI型，是一种基本不含盐的冻干粉。 它常用于测定溶液中葡萄糖和过氧化物的量。 它已用于研究颈脊髓神经元的感觉输入。

生化/生理作用

HRP易与过氧化氢（H₂O₂）结合，而所得的[HRP-H₂O₂]络合物可氧化各种氢供体。最适pH为6.0-6.5而酶在5.0-9.0的pH范围内最为稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合，包括戊*醛，高*酸盐氧化，通过二硫键，以及通过氨基和巯基定向交联剂。它比酶标记β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小且更稳定，因此是最理想的标记。此外，它的糖基化会导致更低低的非特异性结合。

当与底物一起孵育时，辣根过氧化物酶可产生标记分子的有色、荧光或发光衍生物，从而可实现定量。 辣根过氧化物酶已被证明可略微降低cydAB突变体中的抑制水平。 已知的抑制剂包括叠*化钠、氰*物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基*脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨*苯甲酸以及Cd²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺以及Pb²⁺离子。

单位定义

一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

分析说明

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A₄₀₃/A₂₇₅ 。 它是血红素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。