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- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
38
- 英文名：
霍利斯格里蒙菌
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
冻干粉
霍利斯格里蒙菌说明书微生物菌种的培养：
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。
霍利斯格里蒙菌说明书具有两大功能：
（ 1 ）通过灌根可有效防治植物细菌性和真菌性土传病害，同时可使植物叶部的细菌和真菌病害明显减少；
（ 2 ）对植物具有明显的促生长、增产作用。 多粘类芽孢杆菌对细菌性土传病害 ―― 植物青枯病具有很好的防治效果，在收获后期，对番茄、茄子、辣椒、烟草、马铃薯、罗汉果和生姜青枯病（姜瘟病）的田间防效可达 70 ～ -- ％，最高增产率达 493 ％，甚至当对照发病率高达 -- ％时防效也是如此。 多粘类 芽孢杆菌 对芋头软腐病、大白菜软腐病、辣椒 根腐病 、花卉根腐病、玉竹根腐病、沙参根腐病、番茄猝倒病、番茄立枯病以及辣椒疫病等土传 病害 也具有较好的防治作用。 此外，多粘类芽孢杆菌对 植物 具有明显的促生长作用，可使田间植株高度比空白对照区增加 10-30cm ；甚至在植物不发青枯病时，也可使植物的产量增加 27.5% ，且增产主要表现为收获前期。
霍利斯格里蒙菌说明书基本概念。
(1) 菌群：由多种细菌混合组成的相对稳定的细菌群体，具有某些共同性状。如大肠菌群包括大肠杆菌、产气肠细菌及他们之间的过渡类型。
(2) 菌属：菌种的上一级分类，通常性状相近、亲缘关系密切的若干菌种组成一个菌属，如芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳杆菌属等。
(3)是细菌最基本的分类单位，通常指表型特征相似、亲缘关系接近的一类细菌群体，与同属内其他种有着明显差异；当涉及到细菌保存时，菌种是指细菌的种子（用来长期保存）资源。
(4) 菌型：同一菌种的不同细菌，在某些方面存在较小差异的为同一菌型，通常一个菌种内的细菌可以分为多种不同的菌型。
(5) 菌株：由一个独立分离的单细胞系培养而成的纯遗传型群体及其一切后代，一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。
胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA)250g用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测
乙酰胺琼脂 250(g) incubation media 乙酰胺琼脂 250(g)
大肠杆菌显色培养基 1000ml 大肠杆菌显色培养基用于大肠杆菌的快速检测和计数
类杆菌-胆汁-七叶甙(BBE)琼脂250用于脆弱拟杆菌群的分离培养incubationmedia类杆菌-胆汁-七叶甙(BBE)琼脂250用于脆弱拟杆菌群的分离培养
强化梭菌培养基(RCM) 250g 用于梭菌的分离培养
菌种培养基 250g 用于四环素检定中蜡样芽孢杆菌的培养(SN标准)
四环素检定琼脂 250g 用于四环素残留的微生物学检定(SN标准)
亚盐琼脂 250g 用于厌氧亚盐还原杆菌的试管计数(SN标准)
布氏肉汤 250g 用于弯曲杆菌增菌肉汤和布氏琼脂制备(SN标准)
培养基(蛋白胨水)化培养基，用于细菌靛基质试验，亦称色酸肉汤(SN标准)
固体培养基 250g 用于细菌、纤维分解菌、真菌计数培养
桔汁琼脂 ORANGE SERUM AGAR 250 用于饮料中耐酸细菌的分离培养(ACUMEDIA方法)
5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶
0.1%PeptoneWater
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2
IL1R2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 人细胞裂解液 (阳性对照)
滑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
T2细胞，转HLA-2基因B细胞 小鼠癌细胞,MA891细胞 人神经元cDNAHN cDNA
NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CNE(人鼻咽癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0134KU812(人外周血嗜碱性白血病细胞)5×106cells/瓶×2 杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2
IL1R2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 人细胞裂解液 (阳性对照)
滑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
T2细胞，转HLA-2基因B细胞 小鼠癌细胞,MA891细胞 人神经元cDNAHN cDNA
NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CNE(人鼻咽癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0134KU812(人外周血嗜碱性白血病细胞)5×106cells/瓶×2 杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7
霍利斯格里蒙菌说明书IB2 Others Human 人 IB2 / B2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
小鼠成肌细胞;C2C12
Lec1细胞，卵巢细胞 人肝癌细胞,FL62891细胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌细胞)5×106cells/瓶×2
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1
POSTN Others Human 人 OSF2 / POSTN 人细胞裂解液 (阳性对照)
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文献和实验最近做大抽，用的是Qiagen Maxi kit, 一开始抽提产量少，因为是公认的昂贵而好用的试剂盒，觉得是自己操作的不好。就仔细研究了说明书，及整个提取过程，得出一些经验。（high copy plasmid）1.摇菌：菌摇得好不好十分重要。整个过程，其他步骤完全按试剂盒说明操作，一般没有问题，唯独摇菌得自己操作。a.个人觉得还是先活化摇菌8h，在稀释后扩大培养较好，不要偷懒。b.摇菌量问题：试剂盒有推荐cultrue volume，我的推荐100ml，对此我反复思索后，才明白原因
【求助】请教关于xbaI酶切位点甲基化的问题（看了这么多帖子，都好象没分析到位啊）
2012hunanjob 在xbaI酶切位点上：T^CTAGA碱基对应的是AGATC^T，因为质粒是双链，所以在质粒的xbaI酶切位点上中间肯定有GATC，所以说：我觉得理论上只要是dam+细菌提出来的质粒，xbaI酶切位点都受甲基化影响而切不开.但是我见过别人也是用dam+菌扩增过质粒，用xbaI也可以切开它的酶切位点~~~所以我就迷糊了，请各位大侠们多多指点，小弟在此感激不尽了~~~ 2012hunanjob 顶，有没有
组 DNA 断裂，进而造成基因组 DNA 残留，此时应按照说明书轻柔翻转操作； ②加入中和缓冲液后，剧烈振荡会造成质粒 DNA 与蛋白交联； ③漂洗时乙醇没有通过离心或者干燥完全去除，从而影响下游的实验。此外避免内毒素残留是转染级以上的质粒需要严格控制的指标，使用 QIAGEN EndoFree Plasmid kit 系列提取质粒，可以把内毒素控制到 0.1EU/ug 以内，并且在操作过程中无需添加额外的操作步骤。 3. Nanodrop 检测数据分析、检测浓度虚高 Nanodrop 检测基本
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