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- 上海莼试
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- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
24
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20℃或-80℃
- 规格：
5次
填入法 DNA 末端标记试剂盒 A5次规格存新鲜组织样品：
1. 估计完全浸没样品所需要 RNALOCKER 的体积（1g 组织需 10 mL） RNA。
2. 标记收集管并加入估计所需量的 RNALOCKER。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
填入法 DNA 末端标记试剂盒 A5次规格服务流程：
1）客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
非冻型组织 RNA 保存液250mL图片客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作
以下是填入法 DNA 末端标记试剂盒 A5次规格的相关产品正在热销:
KCNE1L 钾离子通道蛋白家族成员1样蛋白抗体规格: 0.2ml
Phospho-Smad3(Ser208) 磷酸化细胞信号转导分子SMAD3抗体规格: 0.1ml
FLT3L FMS样酪氨酸激酶3配体抗体规格: 0.2mlTANC1 TANC1蛋白抗体规格: 0.2ml
MUC13 粘蛋白13抗体规格: 0.2mlPAGE4/GAGE9 前列相关蛋白4抗体规格: 0.2ml
FSTL1/FRP 卵泡相关蛋白1规格: 0.1ml
IDE 胰岛素降解酶抗体规格: 0.1ml
PCID1 PCID1蛋白抗体规格: 0.2ml
MMP24/ MMP25/MMP21 基质金属蛋白酶-24抗体规格: 0.1ml
Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体规格: 0.1ml
A1BG α1B糖蛋白抗体规格: 0.2ml
CAPZA2/CapZ alpha 2 F肌动蛋白α2亚基抗体规格: 0.1ml
填入法 DNA 末端标记试剂盒 A5次规格肌苷-5'-三磷酸三钠盐 CAS: 35908-31-7 英文名称 ITP•Na3 质量规格：>95%,BR
鸟苷-5'-三磷酸二钠盐 CAS: 56001-37-7 英文名称 GTP.Na2 质量规格：>95%,BR
腺苷-5'-二磷酸三锂盐 CAS: 31008-64-7 英文名称 ADP.Li3 质量规格：>97%,BR
赤藓醇;赤藓糖醇 CAS: 149-32-6 英文名称 Erythritol 质量规格：>99%,BR
5ˊ-二磷酸腺苷钡盐 CAS: 40436-88-2 英文名称 ADP.Ba 质量规格：>98%,BR
二磷酸腺苷单钾盐 CAS: 72696-48-1 英文名称 ADP.K 质量规格：>97%,BR
肌苷-5'-二磷酸二钠盐 CAS: 54735-61-4 英文名称 IDP.Na2 质量规格：>98%,BR
腺苷-5’-二磷酸一钠 CAS: 20398-34-9 英文名称 ADP.Na 质量规格：>98%,BR
D-纤维二糖 CAS: 528-50-7 英文名称 D-(+)-Cellobiose 质量规格：>98%,BR
胞苷-5'-二磷酸二钠盐(CDP.Na2) CAS: 54394-90-0 英文名称 Cytidine-5'-diphosphate disodium salt 质量规格：>98%,BR
胞苷-5'-单磷酸二钠盐(CMP.Na2) CAS: 1774143 英文名称 Cytidine-5'-monophosphate Disodium Salt 质量规格：>98%,BR
填入法 DNA 末端标记试剂盒 A5次规格实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:5:24:1)抽提两次(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验一、原理淋巴细胞在有丝分裂原PHA、ConA 等的刺激下，产生增殖反应，DNA和RNA合成明显增加，如在培养液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。二、仪器和材料RPMI-1640 细胞培养液、小牛血清、2-巯基乙醇（2-ME）、青霉素、链霉素、刀豆蛋白A（ConA）、Hank's液、PBS缓冲液（pH7.2-7.4）、3H-TdR、闪烁液[2，5-二苯基恶唑（PPO）0.5g、1，4-双-（5-苯基恶唑基）-苯
，例如细菌的质粒、噬菌体、病毒等，常用的载体一般为质粒；根据需要可直接从公司购买合适的载体，也可以自己构建。（3）连接：目的 DNA 片段和适当载体的连接, 一般采用核酸内切酶分别消化 DNA 片段和载体，使它们的末端能够连接到一起构成重组 DNA 分子。由于所用内切酶的切割特点不同，产生三种连接方式：粘端连接、平端连接和不相配的连接。（4）转化：将连接的重组 DNA 产物导入合适的宿主细胞，使其在宿主细胞内复制扩增或表达，赋予宿主细胞新的生物特征。（5）克隆化：重组 DNA 分子转化大肠杆菌后，在平板
和MacroArray的非放射性检测。两种标记试剂盒（Atlas SpotLight Labeling Kit和SpotLight Random Primer Labeling Kit）适应不同的研究需要，配合通用的杂交检测试剂盒（SpotLight Chemiluminescent Hybridization & Detection Kit），即可组合出完整的非放射性检测分析系统。不过这个系统不适用于玻片基质的芯片的探针标记。 由于Atlas系列的DNA微阵列膜上每个点的核酸量有限，所以对标记探针的灵敏度要求
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