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- 上海莼试
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- 2025年07月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
28
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20℃或-80℃
- 规格：
100mL
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:5:24:1)抽提两次(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
福林酚试剂100mL品牌介绍：
福林酚试剂100mL品牌存新鲜组织样品：
1. 估计完全浸没样品所需要 RNALOCKER 的体积（1g 组织需 10 mL） RNA。
2. 标记收集管并加入估计所需量的 RNALOCKER。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
福林酚试剂100mL品牌服务流程：
1）客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
非冻型组织 RNA 保存液250mL图片客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作
以下是福林酚试剂100mL品牌的相关产品正在热销:
KCNE2 钾离子通道蛋白家族成员2抗体规格: 0.2ml
CD272/BTLA B和T淋巴细胞衰减蛋白抗体规格: 0.2mlSLC25A6 线粒体载体嘌呤核苷酸转运蛋白6抗体规格: 0.2ml
Phospho-PEA15 (Ser104) 磷酸化星形胶质细胞PEA15抗体规格: 0.1ml
4 Hydroxynonenal 4羟基壬烯酸抗体规格: 0.1ml
GLT8D1 糖基转移酶8结构域1抗体规格: 0.2ml
RGS19 G蛋白信号转导调节因子19抗体规格: 0.2ml
phospho-ILK-1(Ser259) 磷酸化整合素连接激酶1抗体规格: 0.1ml
phospho-CSF1R (Tyr723) 磷酸化巨噬细胞集落刺激因子受体抗体规格: 0.1ml
PROCA1 Cyclin A1相互作用蛋白抗体规格: 0.2ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Gold 胶体金标记的驴抗兔IgG规格: 0.5ml
Measles virus fusion protein 麻疹病毒融合蛋白抗体规格: 0.2ml
福林酚试剂100mL品牌大鼠气管上皮细胞完全培养基 100mL
非洲绿猴肾细胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM933
大鼠肾系膜细胞完全培养基 100mL
小鼠胚胎成纤维细胞；C3H 10T1/2 2A6
改良番茄汁琼脂培养基基础 250g
沙门、志贺菌属琼脂培养基（SS琼脂） 250g 用于分离培养沙门氏菌(伤寒沙门氏菌除外) (GB13091-91，ISO标准)。
半固体琼脂 250g 供细菌动力观察、菌种保存等用(GB 4789.4－2010和GB/T4789.8－2008)。
中国蓝琼脂培养基 250g 用于沙门氏菌的前增菌培养(GB4789.4－2010 ，GB4789.40－2010，SN0170-92和GB13091-91，ISO标准)...
科玛嘉李斯特氏菌显色培养基 1000ml/瓶
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文献和实验)100ml，加入试剂B(2%酒石酸钾钠溶液与1%五水硫酸铜等体积混合)2ml混合而成。 福林酚试剂乙：吸取5ml苯酚试剂加入5ml蒸馏水稀释而成。 分光光度计、恒温水浴槽、蛋白质样品 三、操作方法 1、标准曲线的制作：分别吸取0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml标准溶液于小试管中，分别加进不同量的蒸馏水，补足到1ml。各加入5ml试剂甲，混匀后于室温下(25℃左右)放置10min。再加入0.5ml试剂乙，立即混匀，于室温下反应30min
细胞来说要少很多。 最后，针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题，这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话，那就使用超速离心的方法，按照前文建议的预处理操作后，超离后的沉淀也会增加的，同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下，也可以通过试剂盒的方法来提取，除了进口品牌外，也可以使用一些国产试剂盒，质量也不亚于进口品牌的。 总结一下，为了获得高质量的外泌体：需要在细胞培养时减少正常血清的使用，推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基；收获
液层和红细胞层（见图1）。 图1 稀释脐带血离心前后的分层状态图 5） 向离心管中加入10mL 的RPMI 1640培养基洗涤细胞，250g，室温离心 10min ，弃上清。重复该步骤 1~2 次，即可用于后续试验。 3 注意事项 1） 血液新鲜程度是影响分离效果的关键因素，请尽量使用采集后24h内的血液进行CBMC分离。 2） 为保证细胞的活力，整个操作过程请轻柔，避免对细胞造成机械性的损伤。 3） 为保持细胞状态良好，请尽量缩短整个试验的周期。 4 脐带血单个核细胞分离试剂
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