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- 上海莼试
- CS-89458
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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
26
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20℃或-80℃
- 规格：
5次
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:5:24:1)抽提两次(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次品牌介绍：
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次品牌存新鲜组织样品：
1. 估计完全浸没样品所需要 RNALOCKER 的体积（1g 组织需 10 mL） RNA。
2. 标记收集管并加入估计所需量的 RNALOCKER。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次品牌服务流程：
1）客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
非冻型组织 RNA 保存液250mL图片客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作
以下是填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次品牌的相关产品正在热销:
Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的小鼠抗人IgG规格: 0.1ml
SMYD4 组蛋白甲基转移酶SMYD4抗体规格: 0.2ml
GSK-3 Beta (CT) 葡萄糖合成激酶-3β抗体规格: 0.1ml
APOA1 载脂蛋白A1抗体规格: 0.1ml
VWCE VWCE抗体规格: 0.2mlGoat Anti-Guinea pig IgG/Gold 胶体金标记的羊抗豚鼠IgG规格: 0.5ml
RNF13 环指蛋白13抗体规格: 0.2mlERp29 内质网蛋白29抗体规格: 0.1ml
CCDC136/NAG6 鼻咽相关蛋白6抗体规格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗大鼠IgM规格: 0.1ml
SIAH1 泛素连接酶Siah1抗体规格: 0.1ml
C16orf7/ATP-BL 16号染色体开放阅读框7抗体规格: 0.2ml
EGFR 表皮生因子受体抗体规格: 0.1mlHes5 发状分裂相关增强子-5抗体规格: 0.2ml
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次品牌N2-异丁酰-2'-脱氧鸟甙 CAS: 68892-42-2 英文名称 ibu-dG 质量规格：>98%,BR
N-苯甲酰-2'-脱氧胞苷 CAS: 4836-13-9 英文名称 bz-dC 质量规格：>98%,BR
N6-苯甲酰-2'-脱氧腺苷 CAS: 305808-19-9 英文名称 bz-dA 质量规格：>98%,BR
5'-O-三苯甲基尿苷 CAS: 1700118 英文名称 Trt-rU 质量规格：>97%,BR
Trt-dU CAS: 14270-73-6 英文名称 Trt-dU 质量规格：>98%,BR
5'-O-三苯甲基胸苷 CAS: 7791-71-1 英文名称 Trt-dT 质量规格：>98%,BR
5'-DMT-5-碘-2'-脱氧尿苷 CAS: 104375-88-4 英文名称 DMT-5-I-dU 质量规格：>98%,BR
DMT保护性-2'-氟脱氧尿苷 CAS: 146954-74-7 英文名称 DMT-2'-F-dU 质量规格：>98%,BR
DMT保护性-2'-甲氧基尿苷 CAS: 103285-22-9 英文名称 DMT-2'-OMe-U 质量规格：>98%,BR
5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC CAS: 81256-87-3 英文名称 5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC 质量规格：>98%,BR
5’-DMT-2’-TBDMS-rU CAS: 81246-80-2 英文名称 5’-DMT-2’-TBDMS-rU 质量规格：>98%,BR
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文献和实验一、原理淋巴细胞在有丝分裂原PHA、ConA 等的刺激下，产生增殖反应，DNA和RNA合成明显增加，如在培养液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。二、仪器和材料RPMI-1640 细胞培养液、小牛血清、2-巯基乙醇（2-ME）、青霉素、链霉素、刀豆蛋白A（ConA）、Hank's液、PBS缓冲液（pH7.2-7.4）、3H-TdR、闪烁液[2，5-二苯基恶唑（PPO）0.5g、1，4-双-（5-苯基恶唑基）-苯
，例如细菌的质粒、噬菌体、病毒等，常用的载体一般为质粒；根据需要可直接从公司购买合适的载体，也可以自己构建。（3）连接：目的 DNA 片段和适当载体的连接, 一般采用核酸内切酶分别消化 DNA 片段和载体，使它们的末端能够连接到一起构成重组 DNA 分子。由于所用内切酶的切割特点不同，产生三种连接方式：粘端连接、平端连接和不相配的连接。（4）转化：将连接的重组 DNA 产物导入合适的宿主细胞，使其在宿主细胞内复制扩增或表达，赋予宿主细胞新的生物特征。（5）克隆化：重组 DNA 分子转化大肠杆菌后，在平板
实验原理 混合淋巴细胞培养或称混合淋巴细胞反应（MLR）是将二个无关个体的淋巴细胞混合在一起培养，由于二者的淋巴细胞膜上的组织相容性抗原不同，可互相刺激，导致对方的淋巴细胞分裂增殖和转化。转化的淋巴母细胞表现为细胞体积增大，核内DNA和胞浆内RNA合成增加等。可通过形态学方法计数转化的淋巴细胞百分数，也可通过测定激活的淋巴细胞摄取DNA合成的前体-3H标记的胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入量的多少来判定。同位素标记法较为客观，重复
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