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- 百奥莱博
- HQF04-JYZ
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
185
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
试剂盒需储存在-20℃
- 规格：
10次/20次/50次
特别提示：包括Tunel细胞凋亡检测试剂盒（POD）在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Tunel细胞凋亡检测试剂盒（POD）
产品货号：HQF04
产品规格：10次/20次/50次
检测原理：细胞在发生凋亡时，会在生理生化和细胞形态上发生一系列变化，在凋亡中晚期，激活的DNA内切酶会切断核小体间的基因组DNA，DNA会被降解成为约180bp-200bp的片段，而正常或者增殖细胞很少发生DNA断裂。利用这个差异，用脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT酶）把Biotin标记的dUTP标记到断裂DNA片段的3’-OH末端，用POD检测标记并用底物显色，然后进行显微镜观察，这个方法被称为TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法细胞凋亡检测。
产品优势和特点：TUNEL细胞凋亡检测试剂盒，集成了不同厂家产品的诸多特长，形成独特优势和特点：
★ 采用的重组TdT突变体酶活性更高，该转移酶的比活是其他试剂盒里TdT活力的10倍，同样情况下，不被标记的3’-OH 末端可以顺利标记上Biotin，因此检测灵敏度更高；
★ 试剂盒对标记反应的底物进行了反复优化，采用最佳比例的Biotin-dUTP和未标记的dNTP进行3’ -OH末端的核苷酸掺入，使得同一个断裂的DNA片段末端可以形成更长的“标记尾巴”，该“标记尾巴”一方面减少了相邻掺入dNTP上Biotin-dUTP基团的空间位阻，同时增加了每个断裂片段的Biotin基团数目，从而提高检测灵敏度，同时减少非特异性反应；
★ 非凋亡细胞由于缺乏大量的3’-OH 末端，不会被显著掺入和标记Biotin基团；
★ SA-HRP(POD)是采用定点标记技术，不影响SA（链亲和霉素）与Biotin的结合以及HRP的催化活力；
★ 应用范围广，既可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
检测方法：显微镜
样本类型：石蜡包埋组织切片、组织冰冻切片、细胞涂片以及贴壁细胞
储存条件：试剂盒需储存在-20℃非无霜冰箱中，避免反复冻融。建议分装保存Biotin-标记反应混合物。
保存条件：-20°非无霜冰箱，避免反复冻融。建议分装保存Biotin-标记反应混合物。
除了Tunel细胞凋亡检测试剂盒（POD）,，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| YT142 | Caspase 6 活性检测试剂盒 | 20次|100次 |
| YT145 | Caspase抑制剂(Z-VAD-FMK) | 20mM×0.02ml|20mM×0.1ml|5mg |
| YT158 | 细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE) | 5mg |
| SNM505 | Hoechst33342/PI双染试剂盒 | 100T |
| KFS343 | 细胞有丝分裂指数分析试剂盒 | 100T |
| SY0468 | 蛋白A纯化预装柱 | 1ml |
| SY0473 | 细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 647/PI) | 20 rxn |
| SY0478 | AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒 | 20T |
| SY0497 | Hoechst 33258 DNA染料 | 10mg |
| SY1067 | Bcl-2抑制剂(ABT-263) | 5mg |
| ZN1528 | 细胞凋亡检测试剂盒IV(FITC+POD) | 20T |
| QN1299 | Hoechst 33258染色液 | 1mL |
| HR0467 | 放*菌酮 Cycloheximide | 2ml |
| HR0450 | 线粒体红色荧光染色试剂盒 | 1000T |
| HR0424 | Caspase 3活性检测试剂盒 | 20T/50T/100T |
| HR8281 | Annexin V-EGFP/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒 | 20T/50T/100T |
| HR8290 | 活细胞/膜损伤细胞双染试剂盒 | 500T/1000T |
| HR0497 | XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 | 250T/500T/1000T |
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型，绿色荧光)为例) TUNEL检测：使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min，再使用二甲苯脱蜡2次，每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗，便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
用了许多方法检测小鼠的肝脏、脑部、睾丸等组织的细胞凋亡，其中 TUNEL 法做的最多，我购买的试剂盒主要是 roche、 promega 公司，结果大多数成功，偶尔也有失败，下面我把实验中的关键问题与大家共享一下，同时也希望能对初学者有所帮忙。 TUNEL 法的实验原理 基本原理：对不同组织切片先增加细胞膜通透性，然后让 rTDT 和生物标记的 dTUTP 进入细胞内，在 rTDT 的辅助下 dTUTP 与核断裂的 DNA 3』-OH 结合，再用 HRP 标记的链霉
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
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