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- 钰博生物
- YB-11-923
- 中国/美国
- 2025年07月13日
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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Clavibacter michiganensis sub species michiganensis
- 保质期：
保存期限一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次/盒
1. 即开即用，用户只需要提供病毒 RNA 模板。
2. 两管式 RT-PCR，一次 RT 反应产物可以作为多次 PCR 的模板。本试剂盒提供 10 次的 RT 反应试剂和 50 次的 PCR 试剂。
3. 引物经过优化，特异性高，引物是根据基因的保守区域设计，适用于所有强、中、弱新城疫毒株，产物长度为 421 bp。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
马铃薯环腐病qPCR检测试剂盒特点优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
马铃薯环腐病qPCR检测试剂盒性能指标：
1. 试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
规格及成分
| 成分 | 编号 | 50 次纸盒包装 |
| MMLV 逆转录酶 (含 RI) | 80206A | 20 μL |
| RT Buffer（含 dNTP） | 60906C | 60 uL |
| PCR Mix 3.0（含染料） | 90805 | 1.5 mL |
| ND 阳性对照 | 896897 | 50 μL |
| ND 专一性引物一（正向引物） | yw896 | 50 μL |
| ND 专一性引物二（反向引物） | yw897 | 50 μL |
| RNase-free 水 | 80403 | 1 mL |
| 使用手册 | 11-171201sc | 1 份 |
自备试剂：样品 RNA。
马铃薯环腐病qPCR检测试剂盒使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆转录）反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:
| RNA 模板 | 0.01pg-500 ng （如果丌知道浓度则用 1-10 μL） |
| ND 专一性引物二（反向引物） | 2 μL |
| RNase-free 水 | 补水到 12 μL |
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。
三、PCR（60 μL 体系）
1、在 PCR 管中加入下列成分：
| 成 份 | 样品 | ND 阳性对照 | 阴性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 30 μL | 30 μL | 30 μL |
| cDNA 样品（上步的 RT 反应液） | 1-5 uL | 无 | 无 |
| ND 阳性对照 | 无 | 2 μL | 无 |
| ND 专一性引物一（正向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| ND 专一性引物二（反向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 补水到 | 60 uL | ||
| 过程 | 温度 | 时间 | 其他 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | |
| PCR 反应 （40个循环） |
95℃ | 30 s | |
| 50℃ | 30 s | ||
| 72℃ | 40 s | ||
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | |
1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。
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- 内容
- 询问日期
文献和实验(Xanthomonas oryzae)棉花细菌角斑病(X.malvacearum)马铃薯环腐病(Clavibacter sepedonicum)白菜软腐病(Erwinia carotovora)黄瓜细菌角斑病(Pseudomonas lachrymans)苹果根癌病(Agrobacterium tumefaciens)大豆细菌性斑点病(P.glycinea)挑细菌性穿孔病(X.pruni)菜豆细菌性叶烧病(X.phaseoli)水稻条斑病(X.oryzicola)（二）植物细菌病害的简易诊断植物细菌病害的诊断和病原
一、实验目的接合菌亚门的真菌叫接合菌，也是真菌中比较低等的一类，这类真菌的营养体为无隔菌丝体，无性繁殖产生孢囊孢子，有性繁殖产生接合孢子，接合菌分两个纲：接合菌纲(Zygomtcetes)和毛菌纲(Trichomycetes)。与农业病害关系较大的是接合菌纲中的毛霉目(Mucorales)真菌，重要的有两个属：根霉属(Rhizopus)和毛霉属(Mucor)。本实验的目的是熟悉与植病关系密切的接合菌的形态及其所致病害的症状特点，同时观察真菌的异宗配合现象。二、内容、材料和方法毛霉目
至45℃左右的马铃薯琼胶培养基一管倒入培养皿中，轻轻摇动使成平面（分离细菌时则不能加乳酸）。 （3）切取病组织小块（叶斑病类）：取新鲜病叶，选择典型的单个病斑，用剪刀或解剖刀从病斑边缘切取小块（每边长约3―5毫米）病组织数块。 （4）表面消毒：将病组织小块放入70％酒精中浸数秒钟后，按无菌操作法将病组织移入0.1％升汞液中消毒1―3分钟，然后放入灭菌水中连续漂洗三次。也可用漂白粉精片（1－2片），研磨后加灭菌水10ml，消毒5―10分钟。果实、块茎和枝秆等组织内部的病原菌可用脱脂棉蘸70％
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