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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit
- 保质期:
二年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
20polyA+0p20RT+200qPCR/6olyA+60RT+600qPCR
产品概述
MicroRNA (miRNA)是一类长度为19-23 nt的内源性非编码单链小分子RNA,是一种重要的基因表达调控因子。本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾Poly(A),再使用Oligo(dT)-universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应,生成miRNA对应的cDNA第一链,最后采用miRNA的特异性正向引物和通用反向引物进行特异性的miRNA qPCR检测。该试剂盒能够从单一样品中快速、准确地定量检测miRNA,具有高通量,高灵敏度,高特异性等优点。
产品内容
| 组分 | YB427S | YB427L |
| Poly(A) Polymerase(黄色盖) | 20 μL | 60 μL |
| 5× Poly(A) Polymerase Buffer(白色盖) | 40 μL | 120 μL |
| PreScript II Enzyme Mix(绿色盖) | 40 μL | 120 μL |
| 5× PreScript II RT Buffer(红色盖) | 80 μL | 240 μL |
| Universal RTase Primer(透明盖) | 45 μL | 130 μL |
| 2× FQ miRNA SYBR qPCR ProMix(棕色盖) | 1 mL× 2 | 1 mL× 4 |
| mRQ Universal Reverse Primer(透明盖) | 105 μL | 210 μL |
产品优势
高灵敏度:具有宽广的动态变化范围,无需担心样品 量少或miRNA 表达量低而无法精确检测
高特异性:预采用具有茎环结构的通用逆转录引物和高特异的通用qPCR引物,确保检测的特异性
高通量:一次逆转录反应,可检测多个miRNA
实验案例
1. 高灵敏度
将has-mir-144-3P miRNA标准品进行10倍梯度稀释,从1 μM 至10 pM共6个梯度,使用FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit对其进行定量检测 ,并以从A公司购买的同类产品作为对照。结果表明相对于同类产品FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit 具有更低的检测限及更高的灵敏度。
2. 高特异性及高通量
以1 μg X293 Total RNA 为模板,进行加多聚A尾再进行逆转录,将逆转录反应液稀释5倍作为模板,同时检测12种miRNA,每孔添加5 μL。结果表明FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit 可同时检测多种miRNA,且均具有较好的检测特异性,结果可信度高。
应用范围
miRNA定量检测、miRNA表达分析
产品存储
-20℃保存
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文献和实验在反转录前需要进行末端Poly(A)加尾) 2. 茎环状结构的RT引物(ABI产品为主) 由可以自身呈环茎状的特异序列+6到8个miRNA3’端反向互补碱基组成。(一条miRNA序列特异对应一个茎环状结构的RT引物) 三、引物探针设计 由于反转录后得到的cDNA 为(miRNA+RT引物)复合片段。 上游引物可以在miRNA自身序列上找,如果GC含量太低,可以在上游引物5’端加入GCGCC等的保护碱基;下游引物在RT引物的反向互补序列中找;也就是说:上游引物是每个miRNA
RNase H活性缺失的莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶(M-MLV Reverse Transcriptase)的高效反转录合成单链cDNA的试剂盒; All-in-One? qPCR Mix 基于SYBR Green的All-in-One? qPCR 检测试剂盒; All-in-One? miRNA qRT-PCR Detection Kit 采用Poly A加尾法的miRNA qPCR 检测试剂盒;
【共享】很有用的MIRNA(microRNA)检测实验流程(加polyA法)
来对miRNA 进行检测,具有快速、特异性强、 灵敏度高等优点。 miRNA Q-PCR Detection Kit 通过Poly A Polymerase 对miRNA 3’端进行加“Poly A” 处理,同时利用M-MLV RTase 及独特的Oligo dT Adaptor 对Poly A 化的RNA 进行反转录, 最后采用含有SYBR Green 的AllinOne TM Q-PCR Mix 对miRNA 进行特异性检测。 方法背景介绍:(加Poly A法) 方法特征: 检测简便
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