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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
168
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100T(2×250μl)
特别提示:包括200bp DNA ladder(200~3000bp)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:200bp DNA ladder(200~3000bp)
产品货号:RFT005
产品规格:100T(2×250μl)
本产品是由11条带状双链DNA组成的即用型DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。 11条带包括200,400,600,800,1000,1200,1400,1600,1800,2000,3000bp,其中1000bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度为50ng/5μl。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注:根据梳子的厚度和宽度进行上样。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl。窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8-10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间35-40分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
除了200bp DNA ladder(200~3000bp),,我公司还供应以下相关产品:
名称:DNA非变性PAGE上样液
货号:BTN100875
规格:1.5mL
本品是2×的DNA PAGE非变性电泳上样液,含有盐、EDTA和染料等。
产品特点:
1. 即开即用,不需要单独配制各种溶液。
2. 使用简单,电泳的DNA样品与本上样液1:1混合后即可直接上样。
3.染料分子小,染色时不会干扰DNA条带的观察。
4.可用于Gel-Shift等相关实验。
5.跟本公司DNA PAGE非变性电泳套装兼容。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
名称:Super DNA Ladder
货号:WE0243
规格:100次(500μl)|500次(5×500μl)
Super DNA Ladder由10条DNA片段组成,分别为10000bp、5000bp、3000bp、2000bp、1,500 bp、1000bp、750 bp、500 bp、250 bp和100 bp。本产品含有1×Loading Buffer的DNA溶液,可取5μl直接电泳,使用十分方便;电泳时1000bp的DNA片段量约为150ng,显示亮带,其他条带的DNA量约为50ng。
实验前准备及重要注意事项:
1、本产品可直接化冻混匀使用,无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶,以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时,凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大,因此尽量选用质量好的琼脂糖,推荐凝胶浓度为1%-3%,电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大,对短片段DNA分离性能越好;反之,凝胶浓度越小,越有利于长片段DNA的分离。
使用方法:
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽,大于6mm时,须适当增加上样量),进行电泳。
1%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期24个月。
名称:绿色核酸染料(10000×水溶液)(同DuGreen、GelGreen)
货号:SY0245
规格:500μl
本产品是一种独特的油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,不易挥发升华,人体不会吸入。艾姆斯氏测试结果也表明本产品在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此相对于EB的强致癌性是一种安全无毒的核酸染料。适用于各种大小片段核酸的电泳染色,对核酸迁移率的影响远小于SYBR Green I。适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶,室温下在酸或者碱性缓冲液中极其稳定,耐光性强。
本产品适用于琼脂糖和聚丙*酰胺凝胶电泳中的dsDNA、ssDNA以及RNA染色,可以选择胶染法或泡染法进行染色,使用非常方便和灵活。同SYBR Green I的光谱性质,适用于使用254nm激发的紫外凝胶成像透射仪或可见光凝胶透射仪观察。
储存条件:4℃,避免强光直射,有效期12个月。
使用方法
一、胶染法(同EB,电泳前染色)
1 制胶时加入本产品核酸染料(每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL 本产品10000×水溶液,以此类推)。
2 按照常规方法进行电泳。
注意事项
1)此方法比较节省染料,500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
2)由于本产品 具有良好的热稳定性,可以直接添加到热的琼脂糖溶液中而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将本产品储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。
3)本产品兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
4)如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
5)胶染法不适合预制聚丙*酰胺凝胶,对于聚丙*酰胺凝胶请使用泡染法。
二、泡染法(电泳后染色)
1)按照常规方法进行电泳。
2)用H2O将本产品 10000×水溶液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3×染色液。(如将15μL 本产品10,000×水溶液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
3)将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,zuì佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10% 聚丙*酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随聚丙*酰胺含量增加而延长。
注意事项
1)用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
2)3×本产品染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
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文献和实验;还有一个原因是你设置的电压太高,最好是2~4v/cm,跑4~6小时比较合适(2)“我是按说明书上0。8%的琼脂糖”:凝胶浓度太低了,把凝胶浓度加大到2%,放心做,没问题的(3)“说明书上说混合温和”:那是怕你混匀太剧烈导致细胞基因组DNA断裂啊,注意很轻轻的混匀(4)“收集凋亡细胞时离心时转速”:我在实验室中是5000rpm,离心5min,我觉得足已mmyycc :我的ladder总是只有一条带,与对照组差别不大,用的是100v,1-1.5h,不知道是不是这个原因?溴酚兰跑到什么位置合适
发生细胞凋亡时,内源性核酸酶被激活,染色体DNA链在核小体之间被切割,形成180~200个碱基或其整数倍的DNA片段,将这些DNA片段抽提出来进行电泳,可得到DNA梯状条带(DNA ladder)。 一、材料与试剂 凋亡细胞; 蛋白酶K(500μg/ml) 8mol/L 醋酸钾 白细胞裂解液:pH8.0,10mmol/L Tris-HCl,10mmol/L NaCl,10mmol/L EDTA,1% SDS。 氯仿 无水乙醇,70%乙醇; 2%琼脂
相关专题 DNA Ladder是细胞凋亡 时产生的一些DNA片段,经过特定内切酶的酶切作用后,在电泳凝胶上产生多条核酸片段的条带,由于电泳图性状成梯形,因此称为DNA Ladder。DNA Ladder的产生与细胞凋亡密切相关,因此也可以利用DNA Ladder来判断细胞凋亡的标准。 例一 gongyulai :我用的是药物诱导癌细胞凋亡,做DNA Ladder(用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取
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