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265
- 英文名:
Western Blot Ladder Pen
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别提示:包括Western Ladder笔在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Western Ladder笔
英文名称:Western Blot Ladder Pen
产品规格:1000次
蛋白免疫印迹(WB)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,经常用于检测抗体和抗原之间的特异性,而且能够对目的蛋白进行定性或定量分析研究。但是在试验中,抗原或者抗体往往都不是单一的成分,这些可能会导致在最终底片曝光出多条条带,或出现一些不明分子量的条带,或者目的条带的位置都不能确定。因此确定这些条带的分子量对我们进行下一步的分析就显得非常重要。
目前,市场上有一些预染Marker,能很好监测我们的转膜效率,电泳转膜后能在杂交膜上看到Marker相应的条带,但是这些Marker 最终不能在底片上曝出条带。
Western Blot Ladder Pen 正是要为您解决这个问题,通过转膜后对着预染Marker或经过丽春红染色确定的非预染Marker的各条带进行相应的标记,最终这些笔迹都能在目的位置曝光出相应的条带,用作分子量标准。同时也可以用它在膜上做其它标记,或者用作阳性对照。
注意事项:
1、本产品适用于HRP底物系统。
2、WB Ladder Pen使用完成后,请水平放置于2~8℃,请勿冻存于-20℃。
3、使用前请先将WB Ladder Pen在纸上画几笔之后再在膜上做相应的标记。
4、标记过程中请勿用力太大,以免破坏膜的结构,轻划即可。
5、随着笔使用时间的增加,信号可能会逐渐减弱。
操作步骤:
1、电泳的过程中,可以使用预染蛋白Marker或者非预染蛋白Marker。
2、常规的转膜后,将膜取下。
a. 使用预染蛋白Marker的NC膜:去离子水漂洗膜后,使用上下两层滤纸或者卫生 纸吸掉膜上多余的液体(请勿将膜吸的过干)。
b. 使用非预染蛋白Marker的NC膜:丽春红染膜后,用铅笔将非预染蛋白Marker的 各个条带标记。TBST漂洗膜,以完全去掉膜上的丽春红,使用上下两层滤纸或者 卫生纸吸掉膜上多余的液体(请勿将膜吸的过干)。
3、使用WB Ladder Pen在膜上做好相应的标记(轻划即可),放置15秒之后将膜放置 于封闭液中封闭。
4、按常规步骤进行后续的WB试验。
储存条件:2~8℃
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文献和实验例一 gongyulai :我用的是药物诱导癌细胞凋亡,做DNA Ladder(用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取试剂盒)。跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象,Marker到是出来了。我是按说明书上0。8%的琼脂糖。我用的是60v电压。不知道什么原因?郁闷。说明书上说混合温和是什么意思,我又没用力摇。我还想问收集凋亡细胞时离心时转速多少比较好?chujun_hust :(1)“跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象”: 可能是由于你点样时,时间太长了,导致样品扩散
样本准备 蛋白提取 所需仪器:匀浆器、RIPA 裂解液、PMSF(蛋白酶抑制剂)、磷酸酶抑制剂、剪刀、镊子,消毒酒精棉、PBS、移液器、离心机。 裂解液配制——RIPA 裂解液:PMSF=100:1。 1) 组织处理:首先用酒精棉消毒剪刀和镊子,取适量的组织于匀浆器中,用剪刀剪碎加适量的裂解液冰水中匀浆 1-4 min。匀浆结束后吸取溶液于 EP 管中保存备用。(含血液较多的组织可先用 PBS 清洗后再匀浆) 2) 细胞处理: A、 贴壁细胞处理:去掉培养基用 PBS 清洗后加入适量的裂解
从寒武纪中期到石炭纪前期生有的海产化石动物。形成具有甲壳质的群体,从群体最初的胞管(剑盘)上作技状的个体发芽。个体有单胞、双胞和枝胞三种类型。有的在海底固着,有的附着在其他物体上漂浮,还有的本身有浮游器官。在黑色页岩上密集地生长,构成特有的生物区。进化速度快,在进化的对比上是很重要的。在分类上的地位长期不能确定,虽然多数人认为是腔肠动物,但以 R. Kozlowski( 1947)等人为代表的认为是肠鳃类,看来具有更大的说服力。
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