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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
345
- 英文名:
Electron transport chain Complex II assay kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
20管/10样
特别提示:包括线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶)
英文名称:Electron transport chain Complex II assay kit
产品货号:SNM101
产品规格:20管/10样
检测指标:线粒体呼吸链复合物II
线粒体呼吸链复合物II(琥珀酸-辅酶Q还原酶)活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物二氯酚靛酚,通过反应系统测定样品中二氯酚靛酚还原后吸光峰值的变化,即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于其适合于各种纯化线粒体样品(动物、人体、酵母)以及细胞或组织裂解悬液样品的琥珀酸-辅酶Q还原酶的特异性活性检测。可用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。
线粒体呼吸链复合物II,通常称为琥珀酸-辅酶Q还原酶或琥珀酸脱氢酶(Succinate-Coenzyme Q Reductase;Succinate Dehydrogenase),是线粒体电子传递链与三羧酸循环链接的载体:含有四个亚单位,包括共价结合的辅基黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide;FAD)和三个铁硫中心(Fe-S clusters),以及细胞色素b亚单位,其最特征性的酶活性是丙二酸钠敏感的琥珀酸-辅酶Q还原酶。复合物II催化琥珀酸(succinate)被氧化为富马酸(fumarate),线粒体内电子由供体FAD传递到内膜上辅酶Q受体(泛醌;ubiquinone)的能量转移反应,进行呼吸链传递。该酶异常会导致嗜铬细胞瘤(paraganglioma)、肾上腺嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma)和Leigh综合征。基于琥珀酸底物,通过琥珀酸-辅酶Q还原酶的催化,氧化为富马酸,同时氧化型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIP)转化为还原型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIPH2),在分光光度仪下产生吸光峰值的变化(600nm 波长),由此定量测定琥珀酸-辅酶Q还原酶的特异活性。
试剂盒组份:
缓冲液(Reagent A) 20 毫升
反应液(Reagent B) 2.5 毫升
阴性液(Reagent C) 2 毫升
底物液(Reagent D) 500 微升
注意事项
1. 本产品为21 次操作,包括背景对照
2. 操作时,须戴手套
3. 反应液(Reagent B)含有毒性物质,避免直接用手接触
4. 系统操作过程中,背景测定只需1 次
5. 线粒体样品检测前,须溶解;建议冻存融解(-70℃至37℃)循环3 次
6. 如果增强酶活检测,建议使用线粒体复合物待测样品预处理试剂盒-S10342
7. 加入样品启动反应后3 秒内即刻比色测定
8. 比色测定初始读数(0 分钟读数)0.4 左右为理想状态
9. 反应1 分钟后比色测定值趋于稳定;测定值由高到低变化;测定可以持续5 分钟
10.测定值由高到低变化,即5 分钟测定读数低于0 分钟测定读数,表明有酶活性
11.比色测定后,比色皿须清洗彻底
12.建议待测样本线粒体蛋白浓度为10 微克/100 微升;如果样本酶活性过低或过高,则可以增加或降低样本量;注意计算公式的调整(本公司提供线粒体溶解试剂盒为后续的线粒体蛋白浓度测定的预处理试剂盒和 Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒)
13.如果使用细胞或组织裂解悬液,则蛋白浓度为50 微克/100 微升
14.线粒体呼吸链复合物II(琥珀酸-辅酶Q 还原酶)单位活性定义为:在30℃,pH 7.5 条件下,每分钟内能够还原1 微摩尔合成辅酶Q 同功类似物二氯酚靛酚(DCPIP)所需的酶量作为一个活性单位
15.本公司提供系列线粒体及其酶类技术产品
除了线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶),线粒体呼吸链复合物II检测盒,线粒体呼吸链复合物II测试盒,线粒体呼吸链复合物II测定盒,线粒体呼吸链复合物II检测试剂盒,我公司还供应以下相关产品:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| YT361 | ATP检测试剂盒 | 200次 |
| SNM163 | 唾液酸测定试剂盒(带SA标准)(比色法) | 50管/48样 |
| SNM172 | 白蛋白测定试剂盒(带标准:溴*酚绿法) | 100管/96样 |
| SNM210 | 尿微量白蛋白测定试剂盒(免疫比浊法) | R1:50ml×1 R2:10ml×1 |
| SNM277 | 血管紧张素转换酶测定试剂盒(连续监测法) | R1:50ml×3 |
| KFS352 | 乳酸(LD)测试盒(测血清、组织等) | 48T |
| HR8685 | DHE-ROS活性氧检测试剂盒 | 200T |
| HR8824 | 冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒(O12) | 100T |
| HR8841 | 羟自由基检测试剂盒 | 100T/200T |
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| SK008-2 | 柠檬酸合酶(CS)测试盒(可见分光光度法) | 50管/48样|25管/24样|10管/9样 |
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| SK052-1 | 植物类黄酮测试盒(微量法) | 100管/96样 |
| SK075-2 | 食品中亚硝酸盐含量测试盒(可见分光光度法) | 50管/48样 |
| SK087-3 | 谷氨酸(Glu)含量测试盒(HPLC) | 50管/48样 |
| SK148-3 | 蔗糖含量测试盒(HPLC) | 50管/48样 |
| SK188-2 | 红霉素-N-脱甲基酶(ERND)测试盒(可见分光光度法) | 50管/24样 |
| SK335 | 土壤速效氮测试盒(扩散法) | 50管/48样 |
| GL1884 | 脑脊液总蛋白检测试剂盒(比浊比色法) | 50T|100T |
| GL2013 | 维生素C检测试剂盒(磷钼酸比色法) | 50T |
| GL3169 | 植物根系活力检测试剂盒(萘胺微板法) | 100T |
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文献和实验由非血红素铁原子与硫原子构成。不同簇的铁硫中心和蛋白质结合成的各种铁硫蛋白,通过 Fe3 Fe2 的循环参与电子的传递。微生物和动植物组织中都存在铁硫蛋白,在线粒体内膜上常和黄素酶或细胞色素结合成复合物。在从 NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型)到氧的呼吸链中有多个不同的铁硫中心,有的在 NADH泛醌还原酶中参与电子从 NADH传递到泛醌的反应;有的与细胞色素 b及 c1有关。铁硫中心也与琥珀酸脱氢酶相结合。有的铁硫蛋白还在叶绿体中参与光合作用的电子
复合物Ⅱ又称为琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)或琥珀酸-CoQ 酶复合物,功能是催化电子从琥珀酸传递给辅酶Q,由几个不同的多肽组成,其中有两个多肽组成琥珀酸脱氢酶,并且是膜结合蛋白。复合物Ⅱ参与的是低能电子传递途径,将琥珀酸的电子经FAD传给CoQ。复合物Ⅱ传递电子时不伴随氢的传递。
3.使用特异的抑制剂 特异的抑制剂能阻断呼吸链中的特定环节,阻断部位的底物一侧的各种传递体应为还原型,阻断部位的氧一侧的各种传递体应为氧化型,正象我们阻断联通管的底部一样,阻断部位以前的各水管中水是满的,而阻断部位以后的各水管中水均流光(见图6-5,B)。� 图6-5 有氧氧化稳定时各种传递体的还原太分数 A.不加抑制剂 B.加入抗霉A阻断 复合物Ⅰ:催化NADH氧化、CoQ还原。 复合物Ⅱ:催化琥珀酸氧化、CoQ还原 复合物Ⅲ:催化Co QH2氧
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