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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
118
- 英文名:
Green Nucleic Acid Gel Stain (10,000×in Water)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
500μl
特别提示:包括绿色核酸染料(10000×水溶液)(同DuGreen、GelGreen)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:绿色核酸染料(10000×水溶液)(同DuGreen、GelGreen)
英文名称:Green Nucleic Acid Gel Stain (10,000×in Water)
产品货号:SY0245
产品规格:500μl
本产品是一种独特的油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,不易挥发升华,人体不会吸入。艾姆斯氏测试结果也表明本产品在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此相对于EB的强致癌性是一种安全无毒的核酸染料。适用于各种大小片段核酸的电泳染色,对核酸迁移率的影响远小于SYBR Green I。适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶,室温下在酸或者碱性缓冲液中极其稳定,耐光性强。
本产品适用于琼脂糖和聚*烯酰胺凝胶电泳中的dsDNA、ssDNA以及RNA染色,可以选择胶染法或泡染法进行染色,使用非常方便和灵活。同SYBR Green I的光谱性质,适用于使用254nm激发的紫外凝胶成像透射仪或可见光凝胶透射仪观察。
储存条件:4℃,避免强光直射,有效期12个月。
使用方法
一、胶染法(同EB,电泳前染色)
1 制胶时加入本产品核酸染料(每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL 本产品10000×水溶液,以此类推)。
2 按照常规方法进行电泳。
注意事项
1)此方法比较节省染料,500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
2)由于本产品 具有良好的热稳定性,可以直接添加到热的琼脂糖溶液中而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将本产品储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。
3)本产品兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
4)如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
5)胶染法不适合预制聚*烯酰胺凝胶,对于聚*烯酰胺凝胶请使用泡染法。
二、泡染法(电泳后染色)
1)按照常规方法进行电泳。
2)用H2O将本产品 10000×水溶液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3×染色液。(如将15μL 本产品10,000×水溶液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
3)将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10% 聚*烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随聚*烯酰胺含量增加而延长。
注意事项
1)用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
2)3×本产品染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
除了绿色核酸染料(10000×水溶液)(同DuGreen、GelGreen),,我公司还供应以下相关产品:
名称:RNA电泳液,10×
货号:BTN3150
规格:250mL
本品是预配的10×RNA专用电泳液,专门用于RNA甲醛变性胶电泳分析,产品成分为10×MOPS溶液。其特点是即开即用,用户不需要自己进行RNase灭活、高压灭菌、pH调节等操作。与Northern杂交等后续反应兼容。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。
名称:Southern DNA Marker Oligo(DIG标记)
货号:BTN120654F
规格:20次
名称:微量RNA助沉剂
货号:BTN3120
规格:0.5mL
本品是一种经去RNase处理的,能有效地促进微量RNA沉淀回收的大分子聚合物,适用于提取样品中的微量RNA。
产品特点:
1.促进微量RNA的沉淀,其沉淀条件跟常规乙醇或*丙醇RNA沉淀相同,故可直接加入到样品中促进微量RNA的沉淀和回收。
2.使用多样,可以在核酸提取的任何步骤中加入,既可以加到提取液中,也可以加到稀释的RNA样品中。
3.化学惰性,不影响核酸的A260/280光吸收,不影响后续的反应过程(如cDNA 合成RT-PCR和体外转录等)。
4.不含RNase,产品溶解在液相RNase Scavenger中,检测不到残留的RNase。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:用于提取微量组织样品中的RNA(推荐用法)
加入裂解液中使用:按10-20μL RNApp/mL 裂解液的比例将RNApp加入常用RNA提取液(如TRIzol,动物RNA提取试剂盒)中,然后按相应的操作规程直接提取RNA。如果裂解液中含有CTAB,则需要在最后醇沉淀时加入,后续处理不变。
二:用于沉淀回收反应体系中的微量RNA
直接将5-10μL RNApp 加入待沉淀的RNA溶液中,然后按盐/乙醇或盐/*丙醇沉淀RNA的经典操作规程沉淀RNA。
疑难解答:
Q:本产品与DNApp 有何区别?
A:两者化学成分完全相同,只是本产品经过去RNase处理。
名称:5×TBE
货号:RFT190
规格:500ml|10×500ml
本品常用于DNA琼脂糖凝胶电泳。
名称:Goldview核酸染料(10000×)
货号:SY0243
规格:1ml
GoldView是一种可替代溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA 时,其与DNA发生结合并产生很强的荧光信号,灵敏度与 EB 相当,使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈现红色荧光。GoldView特别适合大片段(>1 kb)DNA的检测,灵敏度高。也可用于RNA的染色。
使用方法
1) 将100 ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)在微波炉中融化。
2) 加入5-10 μl GoldView(若背景过高可以适当减少用量;若灵敏度过低,可以适当增加用量),轻轻摇匀,避免产生气泡。
3) 冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4) 电泳完毕,使用凝胶成像系统或可见光透射仪观测。注:若使用凝胶成像系统照相时,通过调节光圈、曝光时间选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项
1) 胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2) 加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响。
3) GoldView特别适用于大片段(>1 kb)DNA的检测。对于更小片段的DNA,特别是<500bp检测信号可能很弱或者无信号。对于<500bp的DNA染色,建议使用SYBR Green I 核酸染料。
4) 含GoldView的凝胶不适合进行胶回收实验。
5) Goldview的主要成分是吖*橙,具有细胞渗透性,有一定的细胞毒性。建议操作人员使用时做好防护措施,带上手套和口罩。并妥善处理好废弃物。
6) 另提供无毒的EB替代物-Dured核酸染料(SY0244),强烈推荐使用。
7) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:RT。
名称:DNA Ladder 5000
货号:JN0098
规格:500μl(100次)
本DNA Marker为预混1×Loading Buffer的DNA溶液,可直接电泳。
片段组成:
100bp,250bp,500bp,750bp,1000bp(加亮),1500bp,2000bp,3000bp,5000bp,其中1000bp条带浓度加倍,约为30 ng/ μl,显示为亮带,使电泳结果更容易辨认,亦可用于定量。其它各条 带浓度约为10 ng/μl。
储存条件:-20℃,有效期2年。
图1:DNA Marker电泳图
图2:DNA Marker条带示意图
表1:DNA Marker选择指南
| 目的条带分子量范围 (推荐琼脂糖%) |
标准分辨率 | 高精分辨率 |
| 1500bp以下 (1.0%到2.0% Agrose) |
200bp DNA Ladder | 100bp DNA Ladder |
| 200bp DNA Ladder Plus | 100bp DNA Ladder Plus | |
| 100bp DNA Ladder ODD | DNA Ladder 2000 Plus | |
| 100bp DNA Ladder ODD Plus | DIY DNA Marker(条带任选) | |
| DNA Ladder 2000 | ||
| 1500bp以上 (0.7% Agrose) |
DNA Ladder 3000 | 1kb DNA Ladder I |
| DNA Ladder 5000 | 1kb DNA Ladder II | |
| DNA Ladder 9000 | 1kb DNA Ladder Plus I | |
| DNA Ladder 10000 | 1kb DNA Ladder Plus II | |
| λ/Hind III DNA Marker | DIY DNA Marker(条带任选) |
表2:DNA Marker系列一览表
| DNA Marker | 条带组成(bp) | 琼脂糖(%) |
| 100bp DNA Ladder | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000 | 1.5% |
| 100bp DNA Ladder Plus | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1200、1500、2000 | 1.0% |
| 100bp DNA Ladder ODD | 100、300、500、700、900、1100、1500 | 1.5% |
| 100bp DNA Ladder ODD Plus | 100、300、500、700、900、1100、1500、2000、3000 | 1.0% |
| 200bp DNA Ladder | 200、400、600、800、1000、1200、2000 | 1.5% |
| 200bp DNA Ladder Plus | 200、400、600、800、1000、1200、2000、3000、5000 | 1.0% |
| DNA Ladder 2000 | 100、250、500、750、1000、2000 | 1.0% |
| DNA Ladder 2000 Plus | 100、250、500、750、1000、2000、3000、4000、5000 | 1.0% |
| DNA Ladder 3000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000 | 0.7% |
| DNA Ladder 5000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000、5000 | 0.7% |
| DNA Ladder 9000 | 500、1000、2000、3000、5000、9000 | 0.7% |
| DNA Ladder 10000 | 500、1000、2000、4000、7000、10000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder I | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder Plus I | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder II | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder Plus II | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
| λ/Hind III DNA Marker | 125、564、2027、2322、4361、6557、9416、23130 | 0.6% |
| DIY DNA Marker(条带任选) | 100、200、250、300、400、500、600、700、750、800、900、1000、1100、1200、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000等24个fregment任选 | 详情请参考说明书 |
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文献和实验器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。对于此类装置,我们推荐您使用DuGreen(Cat# 011或012),它和SYBR Green I的光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。 DuRed使用方法简介 1.胶染法(用法同EB)(推荐方法) (1) 制胶时加入DuRed 核酸染料(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL DuRed 10,000× 储液, 以此比例类推)。 (2) 按照常规方法进行电泳。 注意事项: ♦
替代品。GelRed----真正安全无毒的核酸凝胶染料GelRed and Gelgreen 核酸凝胶染料最灵敏 , 最稳定的核酸凝胶染色试剂,是真正的EB替代产品!由美国BIOTIUM公司技术专家研发的GelRed 和GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的高效荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成任何环境污染。目前大多数商业化的核酸染料(凝胶染色试剂)总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不完全令人满意:EB (溴化乙啶)作为目前使用最广泛
的灵敏度也高于EB。在紫外照射透视下,与双链DNA接合的SybrGreenI呈现明亮的绿色荧光,但其稳定性较差(怕光、怕热),使得染色的重复性较低。它对于50 bp以下的DNA片段染色能力缺失而对小于l00 bp的DNA片段检测灵敏度也较低。SybrGreenI的使用同样简单,致变性也比EB低,但仍然不能保证实验者的安全性,同时其高昂的价格也限制了它的广泛使用。5. GelRed和GelGreenGelRed和GelGreen是集高灵敏、安全和高稳定性于一身极佳的荧光核酸染料。其通过美国环保局安全
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