TaqMan microRNA定量PCR试剂盒

特别提示：包括TaqMan microRNA定量PCR试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TaqMan microRNA定量PCR试剂盒
英文名称：TaqMan microRNA qPCR Kit
产品货号：MTTXXXXX
产品规格：20μl×100次

探针法作为microRNA定量研究的金标准，具有高特异性、高灵敏度的优势。Biorab的TaqMan miRNA定量PCR试剂盒，采用特异性的正向miRNA引物和接头引物进行PCR扩增，检测荧光基团采用FAM标记的TaqMan探针。使用该试剂盒可以高特异性、高灵敏度的检测低至100个细胞的miRNA分子，并可区分相似度极高的miRNAs。Biorab的TaqMan miRNA定量PCR试剂盒多达一万余种，试剂盒编号为MTTxxxxx，每一个mircoRNA分子对应一个检测试剂盒（包含特异性的TaqMan探针、正向引物、反向引物、定量试剂）。

特别说明： 如您研究的miRNA不在我们的TaqMan microRNA qPCR Kit列表(点击下载)之中，请登录www.mirbase.org进行miRNA查询，并来信告知Accession No.和序列，我们将在2～3周内完成试剂盒的定制。

TaqMan microRNA定量PCR试剂盒原理图：


产品组成：

组分	100T×20μl
5×TaqMan qPCR Mix	400μl
50×ROX Reference Dye	200μl
20×miRNA TaqMan Assay	100μl

储存：请置于-20℃，可保存2年；避免反复冻融。

检测效果和应用实例：

1．高灵敏度（最高可到0.1fM级水平)


2．高特异性，有效区分单碱基差异


3．应用实例


内参基因可选择使用：
1．TaqMan RNU6B miRNA 定量 PCR 试剂盒（货号：MTT01501）适用于人、鼠等哺乳动物组织、细胞样品；
2．TaqMan hsa-miR16 miRNA 定量 PCR 试剂盒（货号：MTT01511）适用于来源于人、鼠全血样品。

操作方法：

1．配制反应体系根据机型选择步骤A或B
步骤A：需要添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：ABI 7000/7300/7500/7900 等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

5×TaqMan qPCR Mix	4μl
50×ROX Reference Dye	0.4μl
20×miRNA TaqMan Assay	1μl
cDNA 模板	1～2.5μl
ddH2O	Up to 20μl

注意：cDNA 模板来自于 TaqMan miRNA 反转录产物。
步骤B：无需添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：LightCycler（Roche)； MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad)；Line-Gene(杭州博日)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

5×TaqMan qPCR Mix	4μl
20×miRNA TaqMan Assay	1μl
cDNA 模板	1～2.5μl
ddH2O	Up to 20μl

注意：cDNA 模板来自于 TaqMan miRNA 反转录产物。

2．进行 Real-Time PCR 反应通常采用两步法，程序如下：

Stage 1：	95℃	15分钟
Stage 2：	95℃	10s
	60 ℃	60s	40cycles

收集信号采用FAM 染料通道，反应结束后确认 Real-Time PCR的cDNA 样品和 NTC 阴性对照的扩增曲线。


除了TaqMan microRNA定量PCR试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：
 

货号	名称	规格
YT386	dCTP溶液(100mM)	250μl
YT395	cDNA第一链合成试剂盒(RNase H-)	10次
WE0109	Babuddy超保真DNA聚合酶	100U
WE0133	cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)	100次
WE0137	一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒	100次
WE0147	一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针)	100次
WE0156	BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)	5ml
ALH611	长片段DNA超速PCR MasterMix	1ml|5ml
ALH233	长片段Taq DNA聚合酶	500U|3000U
ALH284	2.5mM dNTP混合溶液	1ml|5ml
ALH257	M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)	10KU|10KU×5
ALH193	两步法耐热RT-qPCR试剂盒	50μl×25次|50μl×50次
ALH199	20×Sybr Green I(荧光定量PCR级)	20μl×100次|20μl×1000次
RFT092	2×Long Taq PCR MasterMix	500μl|5×500μl
SY0049	通用型动物组织PCR试剂盒	50T|200T
JN0018	Taq Plus DNA聚合酶	250U
JN0026	热启动UltraTaq DNA聚合酶	250U
JN0035	2×RoomTop Taq PCR MasterMix	1ml×5
JN0037	多重PCR扩增试剂盒	50μl(100次)
JN0045	PCR优化试剂盒	80次
JN0050	RealTime PCR MasterMix(荧光探针)	20μl×500次
QN0973	2×Taq PCR MasterMix (不含染料)	1ml|5*1ml
MTTXXXXX	TaqMan microRNA定量PCR试剂盒	20μl×100次
MT0017	荧光定量PCR MasterMix(SYBR Green)	1ml|1ml×5|100ml
GL1305	三磷酸腺苷溶液(ATP,10mmol/L)	10ml