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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
243
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100μl
特别提示:包括CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂
CAS#:555-60-2
产品货号:CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂
产品规格:100μl
本品是溶于DMSO的CCCP溶液,浓度为50mM,体积为100μl(相当于1mg的总量),常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC-1(货号SY0488)或者JC-10(货号SY0490)来进行相关研究。
CCCP,即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,一种质子载体(H+ ionophore),是一种强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜,抑制光合作用;CCCP还可抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素C氧化酶。
CCCP还具有其他功能:
1)在牛蛙交感神经方面的实验表明,CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放;
2)作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性;
3)对细胞内钙水平的各种调节效应;
4)抑制脂肝酶的分泌;
5)部分抑制pH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。
英文别名:Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone; m-Cl-CCP; Mesoxalonitrile 3-chlorophenylhydrazone;(3-Chlorophenyl)hydrazonomalononitrile
CAS:555-60-2
分子式:C9H5ClN4
分子量:204.62
纯度:≥97% (TLC)
储存条件:-20℃,有效期12个月
结构式
除了CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂,Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,m-Cl-CCP,Mesoxalonitrile 3-chlorophenylhydrazone,(3-Chlorophenyl)hydrazonomalononitrile,我公司还供应以下相关产品:
名称:细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)
货号:YT121
规格:50次
本试剂盒是目前最先*(代"进")的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提最小片段为180-200bp的DNA ladder,同时又可以抽提到最大50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。
DNA ladder也称DNA fragmentation,是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder,就可以判定细胞发生了凋亡。
样品首先被蛋白酶K消化,随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液,然后加入到纯化柱内。通过高速离心,使DNA在穿过纯化柱的瞬间,结合到纯化柱上,随后通过两次洗涤去除各种杂质,最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚氯*抽提,无需酒精沉淀,样品裂解后仅需约15分钟即可完成。
通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚氯*抽提酒精沉淀方法更加便捷,小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A,可以获得不含RNA的高纯度总DNA,排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。
本试剂盒每次最多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多,反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的最大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA,每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA,每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA,每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量,样品用量最好能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。
对于培养细胞的凋亡检测,通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。
试剂盒组份:
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I——————21ml(第一次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II——————16ml (第一次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液——————22ml
蛋白酶K——————1.1ml
RNase A——————220μl
DNA纯化柱及废液收集管——————50套
注意事项:
1. 温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生,属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀,55℃水浴孵育使沉淀溶解,混匀后使用。
2. 第一次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇,洗涤液II需添加24ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
3. 本试剂盒需使用55℃或70℃水浴,请提前作好准备。
4. 除特别说明外,每次Vortex应控制在5-10秒左右。
5. 本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
6. 废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
储存条件:室温,有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)
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文献和实验和JC-1染色工作液,详见产品使用说明。稀释好的1× JC- 1 Assay Buffer保存在4°C。 2.阳性对照设置,详见产品使用说明;细胞按照实验方案进行凋亡诱导。 3.诱导完成后的细胞,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数。 注:良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时,可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡,对实验结果可能存在不可控的影响,请谨慎处理。 4.取1-5 × 105重悬的细胞,300 g离心5 min,弃上清
PMSF (强大的蛋白酶抑制剂),1 mM EDTA(变性剂和稳定剂),5 µg/ml Aprotinin(蛋白酶抑制剂),5 µg/ml Leupeptin(蛋白酶抑制剂),1% Triton x-100(破坏细胞),1% Sodium deoxycholate(中度变性剂和蛋白溶解剂),0.1% SDS(强变性剂和蛋白溶解剂)。14、裂解buffer:50mM HEPES pH7.0,1mM 甘油,1mM DTT(还原剂),7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解),1mM EDTA(金属鏊合剂
mM Tris-HCl pH 7.4(缓冲体系),150 mM NaCl(等渗体系),1 mM PMSF (强大的蛋白酶抑制剂),1 mM EDTA(变性剂和稳定剂),5 μg/ml Aprotinin(蛋白酶抑制剂),5 μg/ml Leupeptin(蛋白酶抑制剂),1% Triton x-100(破坏细胞),1% Sodium deoxycholate(中度变性剂和蛋白溶解剂),0.1% SDS(强变性剂和蛋白溶解剂)。14. 裂解buffer:50mM HEPES pH7.0,1mM
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