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ECL MULTIPROBE XL
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文献和实验A Proteomics Approach to Identify Redox-Sensitive Proteins
mM Tris, 1,920 mM glycine, and 1% (w/v) SDS. 14. 8–16% Criterion Precast Gels (Bio-Rad). 15. Sypro Ruby (Bio-Rad). 16. Destaining solution: 10% methanol and 7% acetic acid. 17. Multiprobe II Plus (PerkinElmer). 18
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:一、原理二、 分类i.放射自显影 ii.底物化学发光ECL iii.底物荧光ECF iv.底物DAB呈色三、 主要试剂四、 主要步骤五、 实验常见的问题指南1.参考
纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗 体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋 白水平的表达。二、分类western显色的方法主要有以下几种:i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现 常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验
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