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100
- 英文名:
Trypsin
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详询
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详询
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上海烜雅生物科技有限公司
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- 规格:
20
英文名称:Trypsin
细胞的消化以及组化实验中的抗原修复。
本产品仅用于科研
简介
细胞或组织用、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阴性染色结果。所以要求在进行免疫组化染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高检测的准确性。
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval solution,)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时,考虑进行抗原修复。
抗原修复方法:
方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温。
方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。
方法3:高压修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于高压锅,上汽后修复2-5min,然后将高压锅置入凉水中,减压至正常后取出玻片。
注意事项:
1. 脱蜡水化的切片,应避免因切片干燥,而至非特异性染色。
2. 热修复操作时务必谨慎,当心烫伤。
3. 热修复时间过长易导致脱片,请注意控制时间。
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| ACD/PTOP/FITC | 荧光素标记肾上腺皮质发育异常蛋白抗体IgG |
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| ACE2/FITC | 荧光素标记血管紧张素转换酶2抗体IgG |
| ACEI/FITC | 荧光素标记血管紧张素1转换酶抑制剂抗体IgG |
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文献和实验一、SP 法 1)脱蜡、水化;2)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;3)3% H2O2(80% 甲醇)滴加在 TMA 上,室温静置 10 分钟;4)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;5)抗原修复;6)PBS 洗 2~3 次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗 50μl,室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9)4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10)PBS 洗 3 次各 5 分钟;11)滴加 Ⅱ 抗 40~50 μl,室温
抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法,也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位,在进行抗原修复之前,可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而,这一步骤也需要进一步优化,包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时,通常将其分为两大类:蛋白酶诱导表位修复(PIER)和热诱导表位修复(HIER)。一旦优化,抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复(PIER) 在PIER方法中,蛋白酶K、胰蛋白酶和胃
是用一种,还是两种都用? (求助)大鼠心肌组织中检测MMP-2,-9和TIMP-1,-2不知对固定液和抗原修复有没有什么特殊要求 (求助)关于抗原修复液 (求助)抗原修复的问题 (求助)抗原修复相关 (求助)抗原修复液的使用方法 (求助)没有做过cox-2和正在做cox-2的战友 (求助)免疫组化时的抗原修复所用微波炉有什么特殊要求呢? (求助)免疫组化问题 (求助)平滑肌细胞的免疫组化-如何进行抗原修复 (求助)如和用高压灭菌锅进行抗原修复 (求助)石蜡切片做免疫荧光需要抗原修复
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