- ¥70
- 晶抗
- JK2389
- 进口/国产
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
100ml
组织在制作过程中，由于化学试剂的作用封闭了抗原，又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲，致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来，为了解决上述的问题，利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。柠檬酸盐、EDTA或Tris等缓冲液在热的条件下可以使被福尔马林屏蔽的抗原重新暴露出来，同时又不会对抗原表位造成破坏，从而提高抗原的检出率，降低背景染色，提高诊断的准确率。
自备材料：
系列乙醇
双蒸水或去离子水
加热设备
免疫染色洗涤液
操作步骤（仅供参考）：
(一)石蜡切片
1、脱蜡至水
①二3次，每次3～5min。
②无水乙醇脱水2次，每次3～5min。
③95%的乙醇，3～5min。
④90%的乙醇，3～5min。
⑤80%的乙醇，3～5min。
⑥70%的乙醇，3～5min。
⑦蒸馏水冲洗2次，每次3～5min。
2、抗原修复：将切片浸泡在胰蛋白酶抗原修复液中，37℃孵育10～25min。
3、免疫染色洗涤液或自来水洗涤1～2次，每次3～5min，彻底漂洗干净。
4、进行后续的免疫染色步骤。
(二)冰冻切片：
1、免疫染色洗涤液或自来水洗涤切片5min。
2、抗原修复：将切片浸泡在胰蛋白酶抗原修复液中，37℃孵育10～25min。
3、免疫染色洗涤液或自来水洗涤1～2次，每次3～5min，彻底漂洗干净。
4、进行后续的免疫染色步骤。
(三)其它样品：
其它样品参考石蜡切片或冰冻切片进行操作。
注意事项：
胰蛋白酶抗原修复液恢复至室温后再使用，但应避免反复冻融。
浸泡在胰蛋白酶抗原修复液中，佳孵育时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验之间的接触面，减少空间位阻，提高亲和层析的结合效率。合成过程要经过载体活化，接” 臀”、活化及连接配基等操作步骤。 目前常用的载体是琼脂糖胶粒。它具有机械强度高、透性好、载体本身非特异性吸附少等优点。除此以外，其他可用作载体的材料还有纤维素、葡聚糖凝胶(SePhadex)、多孔硅胶、树脂等。但是它们都具有不同程度的非特异性吸附，因此目前使用的并不多。 本实验采用猪胰蛋白酶的天然抑制剂—鸡卵类粘蛋白作为配基.从猪胰脏的粗提液中分离纯化胰蛋白酶。鸡卵类粘蛋白是一种专一性很强
一、SP 法 1）脱蜡、水化；2）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；3）3% H2O2（80% 甲醇）滴加在 TMA 上，室温静置 10 分钟；4）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；5）抗原修复；6）PBS 洗 2～3 次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗 50μl，室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9）4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10）PBS 洗 3 次各 5 分钟；11）滴加 Ⅱ 抗 40～50 μl，室温
抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法，也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位，在进行抗原修复之前，可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而，这一步骤也需要进一步优化，包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时，通常将其分为两大类：蛋白酶诱导表位修复（PIER）和热诱导表位修复（HIER）。一旦优化，抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复（PIER） 在PIER方法中，蛋白酶K、胰蛋白酶和胃
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