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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
470
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
2×500ml
特别提示:包括原果胶(SP)提取液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:原果胶(SP)提取液
产品货号:GL2518
产品规格:2×500ml
用途:
主要用于提取植物组织或果实中可溶性果胶和原果胶
注意事项:
天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中,是细胞壁的一种组成成分,它们伴随纤维素而存在,构成相邻细胞中间层粘结物,使植物组织细胞紧紧黏结在一起。原果胶是不溶于水的物质,但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下,加水分解转变成水溶性果胶。果胶(Pectin)又称多聚半乳糖醛酸,是由D-半乳糖醛酸以α-1,4糖苷键连接形成的直链状聚合物,本质上是一种线形的多糖聚合物,
除了原果胶(SP)提取液,,我公司还供应以下相关产品:
名称:真菌总蛋白质微量提取试剂盒
货号:BTN81202
规格:50次
本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法,适合于各种形态的各种酵母材料。
产品特点:
1.破壁效率高,能达到80-90%。
2.可以处理各种酵母样品。
3.操作简单,得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分析。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B成分一 | 50ml |
| 溶液B成分二 | 1.5g |
| 玻璃珠,400μm | 5g |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输、4℃保存(溶液B成分二需-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
准备工作:将溶液B成分二(干粉)全部加到50mL溶液B成分一中,充分摇晃使之全部溶解,成为溶液B,然后分装成小分(体积根据每次实验的样品数决定)并放-20℃长期保存。
1.将酵母细胞接种到5mL YPD培养基中,30℃摇晃(250rpm/分钟)过夜培养使其OD600达到0.5~2.0。
2.把酵母细胞培养物转到装有2mL预冷溶液A的10-15mL离心管中,混匀。
3.4℃,5000g离心5分钟沉淀酵母细胞,吸出上清液。
4.用30μL溶液B悬浮酵母细胞,并快速转移到1.5mL塑料离心管中。
5.100℃下保温3分钟,使蛋白酶失活,样品存放于-20℃。
6.加入0.1g的玻璃珠。
7.在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10分钟。
8.加入70μl溶液B,稍加振荡,置100℃保温1分钟。
9.取5-20μl抽提液上样直接进行SDS-PAGE凝胶电泳。
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文献和实验再进行位点专一重组转入表达载体。Qiagen是一个载体通杀,给它加上大肠杆菌、杆装病毒和哺乳动物的启动子,这么看来Qiagen好像是最方便的,但是原核和真核的RNA聚合酶识别序列毕竟是不同的,对其表达的效率存在一定质疑。Promega的多系统表达有个突出的地方是它不单有普通原核表达、融合原核表达、哺乳动物表达,它还有体外表达。从哺乳动物细胞中提取的或通过克隆化DNA在体外转录产生的mRNA,在无细胞提取液中能被翻译而合成蛋白质,这些蛋白质可用于免疫沉淀实验或进行生物活性测定。一般用来进行体外
-20℃冷冻保藏,待测。 1.4 仪器 高效液相色谱(HPLC)仪:SIB810型泵、SP8450型UV检测器;反相C-18柱;微量进样器(25μl) (美国光谱物理公司);YQ-3型电动匀浆机(江苏江阴科研器械厂);LD4-2A离心机:4500r/min(北京医用离心机厂);旋涡混合器:WH361型(江苏太仓鹿河生化仪器厂)。 1.5 试剂 所用甲醇为重蒸过滤甲醇;水为重蒸馏水。乙腈 (色谱纯);甲醇,乙酸铵,柠檬酸,依地酸二钠 (分析纯);磷酸氢二钠,磷酸氢二铵
-100除去了部分杂蛋白,但接着再用阳离子交换柱SP分离(20mM PB ph=7.00),发现目的蛋白根本挂不上.我想试用硫酸铵分级沉淀除去部分杂蛋白,再过s-100.但不知硫酸铵分级沉淀该如何具体操作? 你可以先把缓冲液pH调到6试试能不能挂柱,此外其实你的蛋白分子量很小,杂质应该大多分子量比它大,你直接过sephadex G50那么大于30kd的很快就出来,或者上superdex 30 大于10KD的先出来,而你要的在后面,然后你再用离子交换试试,S-100分离范围比较宽,去杂质没有前面说
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